Antсемлек һәм патоген материаллары
Сорга ассоциациясе халыкны картографиянең конверсия популяциясе (SCP) дип атый, Иллинойс Университетында (хәзерге Дэвис УК) доктор Пэт Браун тарафыннан бирелгән.Элегерәк ул тасвирланган һәм фотопериод-сизгерлеккә һәм кечерәк буйга әверелгән төрле сызыклар җыелмасы, АКШ шартларында үсемлекләрнең үсешен һәм үсешен җиңеләйтә.Бу тикшеренүдә бу халыктан 510 юл кулланылды, начар үсү һәм сыйфат белән идарә итү проблемалары аркасында, өч линияне дә анализлау өчен барлык сызыклар кулланылмады.Ахырда, 345 юлдан алынган мәгълүматлар хитин реакциясен анализлау өчен, flg22 җавап өчен 472 юл, TLS каршылыгы өчен 456 юл кулланылды.B. cookeiLSLP18 штаммы Арканзас университетында доктор Берт Блюхтан алынган.
MAMP җавап үлчәве
Бу тикшерүдә flg22, (Genscript каталогы # RP19986) һәм хитинда ике төрле MAMP кулланылды.Сорга үсемлекләре теплицада туфрак белән тутырылган фатирларга салынган кыстыргычларда үстерелгән (33% Кояшлы Redi-Earth Pro Growing Mix).Collectionсемлекләр җыю көнендә өстәмә яфрак дымыннан саклану өчен, үрнәк җыю алдыннан сугарылган.
Сызыклар раномизацияләнгән һәм логистик сәбәпләр аркасында 60 юлдан торган партияләргә утыртылган.Eachәр сызык өчен өч «чүлмәк» бер сызыкка ике орлык утыртылды.Соңгы партияләр алдагы партия эшкәртелгәннән соң, бөтен халык бәяләнгәнче утыртылды.Ике эксперименталь йөгерү ике MAMP өчен дә генотиплар белән ике йөгерешнең һәрберсендә яңадан раномизацияләнгән.
ROS анализлары алда әйтелгәнчә башкарылды.Кыскасы, һәр сызык өчен 3 төрле чүлмәккә алты орлык утыртылды.Нәтиҗә ясалган үсентеләрнең өчесе бердәмлеккә нигезләнеп сайланды.Гадәттән тыш күренгән яки күпчелеккә караганда озынрак яки кыскарак орлыклар кулланылмады.Өч төрле 15 көнлек сорга үсемлекләренең 4 яфрагының иң киң өлешеннән 3 мм диаметрлы дүрт яфрак диск чыгарылды.Ике үсемлектән яфракка бер диск, бер үсемлектән ике диск, икенче диск су контроле булып тора (аста карагыз).Дисклар 50 µl H20 өстендә кара 96 кое тәлинкәдә йөзделәр, яктылыкка эләкмәс өчен алюминий мөһер белән мөһерләнделәр һәм төнлә бүлмә температурасында сакландылар.Икенче көнне иртән 2-мг / мл химилуминсент зонасы L-012 (Вако, каталог 120 120-04891), 2 мг / мл атлы пероксидаз (VI тибы, Сигма-Алдрич, каталог # P6782) ярдәмендә реакция чишелеше ясалды. 100 мг / мл Читин яки 2 μM Flg22.Бу реакция эремәсенең 50 µл дүрт скважинаның өчесенә кушылды.Дүртенче скважина мок контроле иде, аңа MAMPны исәпкә алмаганда реакция чишелеше өстәлде.Eachәрбер табакка су гына булган дүрт буш кое кертелгән.
Реакция чишелешен өстәгәннән соң, люминесценс SynergyTM 2 күп ачыклау микроплаты укучысы (BioTek) ярдәмендә 2 минутта 1 сәг.Тәлинкә укучы бу 1 сәг.Барлык 31 укуларның суммасы һәр кое өчен кыйммәт бирү өчен исәпләнде.Genәр генотип өчен MAMP җавап өчен смета бәясе (өч эксперимент скважинаның уртача люминесцент бәясе - мыскыллау кое бәясе) - уртача буш скважина бәясе белән исәпләнде.Буш кое кыйммәтләре эзлекле рәвештә нульгә якын иде.
Яфрак дискларыНикотиана бентамиана, бер югары җаваплы сорга сызыгы (SC0003), һәм бер түбән җаваплы сорга сызыгы (PI 6069) шулай ук сыйфат контроле максатларында һәр 96 кое тәлинкәдә контроль буларак кертелде.
B. cookeiинокулум әзерләү һәм прививка
B. cookeiинокулум алда әйтелгәнчә әзерләнгән.Кыскасы, сорга бөртекләре өч көн суга баттылар, чайкадылар, 1Л конус савытларына кертелде һәм 15psi һәм 121 ° C температурада бер сәгать автоклавланды.Бөртекләр яңа культурадан 5 мл чамасы микелия белән прививка ясадыларB. cookeiLSLP18 изоляцияләнә һәм бүлмә температурасында 2 атнага китә, флассаларны 3 көн саен селкетә.2 атна узгач, гөмбә сорга бөртекләрен һавада киптерделәр, аннары кыр прививкасына кадәр 4 ° C сакладылар.Шул ук инокулум бөтен сынау өчен кулланылды һәм ел саен яңартылды.Инокация өчен 6-10 атналык бөртеклеләр 4-5 атналык иске сорга үсемлекләренә кертелде.Бу гөмбәләрдән ясалган споралар бер атна эчендә яшь сорга үсемлекләренә инфекция кертә.
Орлык әзерләү
Кырда утыртканчы сорга орлыгы фунгицид, инсектицид һәм сафер катнашмасы белән эшкәртелде ~ 1% Спирато 480 FS фунгицид, 4% Себер 480 FS фунгицид, 3% Сорпро 940 ES орлык саклаучысы.Аннары орлыклар 3 көн һава белән киптерелде, бу орлык тирәсендә бу катнашманың нечкә каплавын тәэмин итте.Саклаучы гербицид Dual Magnum барлыкка килү алдыннан дәвалау өчен кулланырга рөхсәт итте.
Максатлы яфрак тапларына каршы торуны бәяләү
SCP Клейтондагы NCзәк Уҗымнар Тикшерү станциясендә 2017 елның 14-15 июнендә һәм 2018 елның 20 июнендә ранальләштерелгән тулы блок дизайнында утыртылды, һәр очракта ике эксперимент репликасы.Тикшеренүләр 1,8 м бер рәткә 0,9 м киңлектә, бер участокка 10 орлык кулланып утыртылды.Кыр эффектларын булдырмас өчен, һәр экспериментның перифериясе тирәсендә ике чик рәтләре утыртылды.Тикшеренүләр 2017 елның 20 июлендә һәм 2018 елның 20 июлендә прививка ясалды, шул вакытта сорга үсемлекләре 3 этапта иде. Рейтинглар бердән тугыз таразага алынды, анда авыру билгеләре булмаган үсемлекләр тугыз һәм тулысынча тупланды. үлгән үсемлекләр бер итеп тупланды.Ике рейтинг 2017-нче елда һәм 2018-нче елда дүрт укылыш ел саен прививкадан соң ике атнадан башланды.sAUDPC (авырулар үсеше сызыгы буенча стандартлаштырылган өлкә) алда әйтелгәнчә исәпләнде.
Пост вакыты: 01-2021 апрель