DELLA белгечләре сакланган мастерүсеш көйләүчеләреэчке һәм экологик сорауларга җавап итеп үсемлек үсешен контрольдә тоту үзәк роль уйный. DELLA транскрипцияле регулятор ролен башкара һәм GRAS домены аша транскрипция факторларына (TF) һәм гистон H2A белән бәйләп, промоутерларга туплана. Соңгы тикшеренүләр күрсәткәнчә, DELLA тотрыклылыгы тәрҗемә итүдән соң ике механизм аша көйләнә: фитохормон гиббереллин китергән полюбикуитинация, аның тиз бозылуына китерә, һәм аның туплануын арттыру өчен кечкенә убукуитинга охшаган модификаторлар (SUMO). Моннан тыш, DELLA эшчәнлеге динамик рәвештә ике төрле гликозиляция белән көйләнә: DELLA-TF үзара бәйләнеш O-фукосиляция ярдәмендә көчәйтелә, ләкин O-бәйләнгән N-ацетилглукозамин (O-GlcNAc) модификациясе белән тыела. Ләкин, DELLA фосфориляциясенең роле аңлашылмый кала, чөнки алдагы тикшеренүләр каршылыклы нәтиҗәләр күрсәттеләр, фосфориляциянең DELLA деградациясен алга этәрүен яки киметүен күрсәткәннәрдән алып, фосфориляция аның тотрыклылыгына тәэсир итмәвен күрсәтә. Монда без REPRESSORдагы фосфориляция сайтларын ачыклыйбызga1-3(RGA, AtDELLA) массив спектрометрия анализы белән Arabidopsis taliana белән чистартылган һәм PolyS һәм PolyS / T өлкәләрендә ике RGA пептидының фосфориляциясенең H2A бәйләнешен һәм RGA эшчәнлеген көчәйтүен күрсәтәләр. Максатлы промоутерлар белән RGA ассоциациясе. Фосфориляция RGA-TF үзара бәйләнешенә яки RGA тотрыклылыгына тәэсир итми. Безнең тикшерү молекуляр механизмны ачып бирә, аның ярдәмендә фосфориляция DELLA эшчәнлеген этәрә.
DELLA функциясен көйләүдә фосфориляциянең ролен ачыклау өчен, DELLA фосфориляция мәйданнарын вивода ачыклау һәм үсемлекләрдә функциональ анализ ясау бик мөһим. MSсемлек экстрактларын якынайтып, MS / MS анализы белән, без RGAда берничә фосфозитны ачыкладык. GA җитешмәү шартларында RHA фосфориляциясе арта, ләкин фосфориляция аның тотрыклылыгына тәэсир итми. Иң мөһиме, co-IP һәм ChIP-qPCR анализлары ачыклады, RGAның PolyS / T төбәгендәге фосфориляция H2A белән үзара бәйләнешне һәм максатчан промоутерлар белән берләшүне көчәйтә, фосфориляция RGA функциясен китерә торган механизмны ачып бирә.
RGA LHR1 субдоменының TF белән үзара тәэсире аша хроматинны максат итеп алына, аннары PolyS / T өлкәсе һәм PFYRE субдомены аша H2A белән бәйләнә, RGAны тотрыклыландыру өчен H2A-RGA-TF комплексын формалаштыра. PolyS / T өлкәсендә DELLA домены һәм GRAS домены арасында билгесез киназ арасында Pep 2 фосфориляциясе RGA-H2A бәйләнешен көчәйтә. Rgam2A мутант белок RGA фосфориляциясен юкка чыгара һәм H2A бәйләнешенә комачаулау өчен бүтән протеин конформациясен кабул итә. Бу вакытлы TF-rgam2A үзара бәйләнешнең тотрыксызлануына һәм rgam2Aның максатлы хроматиннан аерылуына китерә. Бу рәсемдә RGA-арадаш транскрипция репрессияләре генә сурәтләнә. Охшаш үрнәк RGA-арадаш транскрипция активлаштыру өчен сурәтләнергә мөмкин, H2A-RGA-TF комплексы максатлы ген транскрипциясен алга этәрәчәк һәм rgam2A дефосфориляциясе транскрипцияне киметәчәк. Хуанг һәм башкалардан үзгәртелгән рәсем.
Барлык санлы мәгълүматлар Excel ярдәмендә статистик анализ ясалды, һәм студентлар тесты ярдәмендә зур аермалар билгеләнде. Ampleрнәкнең зурлыгын билгеләү өчен бернинди статистик ысул да кулланылмады. Анализдан бернинди мәгълүмат та читтә калмады; эксперимент очраклы булмаган; тикшерүчеләр эксперимент вакытында мәгълүмат таратуны һәм нәтиҗәләрне бәяләүне күрмәделәр. Ampleрнәк күләме фигура легендасында һәм чыганак мәгълүмат файлында күрсәтелгән.
Өйрәнү дизайны турында күбрәк мәгълүмат алу өчен, бу мәкалә белән бәйле табигый портфолио отчетын карагыз.
Масса спектрометрия протеомикасы мәгълүматлары ProteomeXchange консорциумына PRIDE66 партнер репозитариясе аша PXD046004 мәгълүматлар идентификаторы ярдәмендә кертелде. Бу өйрәнү вакытында алынган бүтән мәгълүматлар Өстәмә Мәгълүмат, Өстәмә Мәгълүмат Файллары һәм Чимал Файлларында тәкъдим ителә. Бу мәкалә өчен чыганак мәгълүматлары бирелгән.
Пост вакыты: Ноябрь-08-2024