DELLA аксымнары сакланган осталарүсеш регуляторларыэчке һәм әйләнә-тирә мохит сигналларына җавап итеп үсемлек үсешен контрольдә тотуда үзәк роль уйный торган DELLA транскрипция регуляторы булып тора һәм үзенең GRAS домены аша транскрипция факторларына (TFs) һәм гистон H2A белән бәйләнешкә кереп, максатчан промоторлар өчен җәлеп ителә. Соңгы тикшеренүләр DELLA тотрыклылыгының трансляциядән соңгы ике механизм аша көйләнүен күрсәтте: фитогормон гиббереллин тарафыннан индукцияләнгән полиубиквитинлаштыру, бу аның тиз таркалуына китерә һәм аның туплануын арттыру өчен кечкенә убиквитинга охшаш модификаторларның (SUMO) конъюгациясе. Моннан тыш, DELLA активлыгы ике төрле гликозилизация белән динамик рәвештә көйләнә: DELLA-TF үзара бәйләнеше O-фукозилизация белән көчәйтелә, ләкин O-бәйләнешле N-ацетилглюкозамин (O-GlcNAc) модификациясе белән тоткарлана. Ләкин, DELLA фосфорлашуының роле ачык түгел, чөнки алдагы тикшеренүләр каршылыклы нәтиҗәләр күрсәтте, фосфорлашу DELL таркалуын стимуллаштыруын яки киметүне күрсәтүче нәтиҗәләрдән алып, фосфорлашуның аның тотрыклылыгына тәэсир итмәвен күрсәтүче башка нәтиҗәләргә кадәр. Монда без РЕПРЕССОРдагы фосфорлашу урыннарын билгелибез.ga1-3(RGA, AtDELLA) Arabidopsis thaliana'дан масса-спектрометрия анализы ярдәмендә чистартылган һәм PolyS һәм PolyS/T өлкәләрендә ике RGA пептидының фосфорлашуы H2A бәйләнешен көчәйтә һәм RGA активлыгын арттыра икәнен күрсәтә. RGA'ның максатлы промоторлар белән бәйләнеше. Шунысы игътибарга лаек, фосфорлашу RGA-TF үзара бәйләнешләренә яки RGA тотрыклылыгына тәэсир итми. Безнең тикшеренү фосфорлашуның DELLA активлыгын индукцияләүнең молекуляр механизмын ача.
DELLA функциясен көйләүдә фосфорлашуның ролен ачыклау өчен, DELLA фосфорлашу урыннарын in vivo ачыклау һәм үсемлекләрдә функциональ анализлар үткәрү бик мөһим. Үсемлек экстрактларын аффинитет чистарту һәм аннан соң MS/MS анализы ярдәмендә без RGAда берничә фосфозит ачыкладык. GA җитмәү шартларында RHA фосфорлашуы арта, ләкин фосфорлашу аның тотрыклылыгына тәэсир итми. Иң мөһиме, co-IP һәм ChIP-qPCR анализлары RGAның PolyS/T өлкәсендә фосфорлашуның аның H2A белән үзара бәйләнешен һәм максатлы промоторлар белән бәйләнешен көчәйтүен күрсәтте, фосфорлашуның RGA функциясен ничек индукцияләү механизмын ачыклады.
RGA, LHR1 субдоменының TF белән үзара бәйләнеше аша хроматинны максат итеп кую өчен җәлеп ителә, аннары PolyS/T өлкәсе һәм PFYRE субдомены аша H2A белән бәйләнешкә керә, RGAны тотрыклыландыру өчен H2A-RGA-TF комплексы барлыкка китерә. DELLA домены һәм GRAS домены арасындагы PolyS/T өлкәсендә Pep 2 фосфорлануы билгесез киназа белән RGA-H2A бәйләнешен көчәйтә. rgam2A мутант аксымы RGA фосфорлануын юкка чыгара һәм H2A бәйләнешенә комачаулау өчен башка аксым конформациясен кабул итә. Бу вакытлыча TF-rgam2A үзара бәйләнешләренең тотрыксызлануына һәм rgam2Aның максатлы хроматиннан диссоциациясенә китерә. Бу рәсемдә бары тик RGA аша транскрипция репрессиясе генә күрсәтелгән. RGA аша транскрипция активлашуы өчен охшаш үрнәк сурәтләнергә мөмкин, ләкин H2A-RGA-TF комплексы максатлы ген транскрипциясен стимуллаштырачак, ә rgam2A депосфорлануы транскрипцияне киметәчәк. Рәсем Huang et al.21 дан үзгәртелгән.
Барлык санлы мәгълүматлар да Excel ярдәмендә статистик анализланды, һәм әһәмиятле аермалар Стьюдентның t тесты ярдәмендә билгеләнде. Сайлау күләмен алдан билгеләү өчен бернинди статистик ысуллар да кулланылмады. Анализдан бернинди мәгълүмат та чыгарылмады; эксперимент очраклы рәвештә сайланмады; тикшеренүчеләр эксперимент вакытында мәгълүматларның таралуын һәм нәтиҗәләрне бәяләүне күрмәмешкә салыштылар. Сайлау күләме рәсем легендасында һәм чыганак мәгълүмат файлында күрсәтелгән.
Тикшеренү дизайны турында тулырак мәгълүмат алу өчен, әлеге мәкалә белән бәйле Табигый портфолио отчетының аннотациясен карагыз.
Масса-спектрометрия протеомикасы мәгълүматлары PXD046004 мәгълүматлар җыелмасы идентификаторы булган PRIDE66 партнер репозиторийы аша ProteomeXchange консорциумына кертелде. Бу тикшеренү барышында алынган барлык башка мәгълүматлар Өстәмә мәгълүматта, Өстәмә мәгълүмат файлларында һәм Чимал мәгълүмат файлларында тәкъдим ителә. Чыганак мәгълүматлары бу мәкалә өчен бирелгән.
Бастырып чыгару вакыты: 2024 елның 8 ноябре