Бу тикшеренү коммерциянең үлеменә, сублеталлыгына һәм агулыгына бәя бирдекиперметринануран тадполларына формулировкалар. Кискен тестта 100–800 μg / L концентрацияләре 96 сәг. Хроник тестта, табигый рәвештә булган киперметрин концентрацияләре (1, 3, 6, һәм 20 μg / L) үлем өчен сынадылар, аннары микронуклей тесты һәм кызыл кан күзәнәкләренең атом аномальлеге 7 көн дәвамында. Коммерция киперметрин формулировкасының LC50 273,41 μg L - 1 иде. Хроник тестта иң югары концентрация (20 μg L - 1) 50% тан артык үлемгә китерде, чөнки ул сыналган тадпольнең яртысын үтерде. Микронуклеус тесты 6 һәм 20 μg L - 1 күләмендә мөһим нәтиҗәләр күрсәтте һәм берничә атом аномальлеге ачыкланды, бу коммерция киперметрин формуласының P. gracilisка каршы генотоксик потенциалын күрсәтә. Киперметрин - бу төр өчен бик зур куркыныч, бу күп проблемалар тудырырга һәм кыска һәм озак вакыт эчендә бу экосистеманың динамикасына йогынты ясарга мөмкинлеген күрсәтә. Шуңа күрә, нәтиҗә ясарга була, коммерция циперметрин формуляцияләре P. gracilisга токсик тәэсир итә.
Авыл хуҗалыгы эшчәнлеген өзлексез киңәйтү һәм интенсив куллану аркасындакорткычлар белән көрәшчаралар, су хайваннары пестицидларга еш тәэсир итәләр1,2. Авыл хуҗалыгы кырлары янындагы су ресурсларын пычрату амфибия кебек максатсыз организмнарның үсешенә һәм яшәвенә тәэсир итә ала.
Амфибияләр экологик матрицаларны бәяләүдә көннән-көн мөһимрәк булып китәләр. Анураннар катлаулы тормыш цикллары, личинкаларның тиз үсү темплары, трофик статусы, үткәргеч тире10,11, үрчү өчен суга бәйле булу һәм сакланмаган йомырка кебек уникаль характеристикалары аркасында әйләнә-тирә мохитне пычратучы яхшы биоиндикаторлар булып санала. Кечкенә су бакасы (Physalaemus gracilis), гадәттә елый торган бака дип аталган, пестицид пычрануның биоиндикатор төре булып күрсәтелде4,5,6,7,15. Төрләр суларда, сакланган территорияләрдә яки Аргентина, Уругвай, Парагвай һәм Бразилиядә үзгәрә торган урыннарда очрый1617 һәм төрле яшәү урыннарының киң таралуы һәм толерантлыгы аркасында IUCN классификациясе буенча тотрыклы санала18.
Сублеталь эффектлар циперметринга тәэсир иткәннән соң хәбәр ителде, шул исәптән тадпольсдагы тәртип, морфологик һәм биохимик үзгәрешләр, үлем һәм метаморфоз вакыты үзгәрде, энзиматик үзгәрешләр, йомырка уңышының кимүе24,25, гиперактивлык26, холинестераз эшчәнлеген тыю27 һәм йөзү эшенең үзгәрүе7,28. Ләкин, амфибияләрдә циперметринның генотоксик эффектларын өйрәнү чикләнгән. Шуңа күрә, ануран төрләренең киперметринга сизгерлеген бәяләү мөһим.
Әйләнә-тирә мохитнең пычрануы амфибияләрнең гадәти үсешенә һәм үсешенә тәэсир итә, ләкин иң җитди тискәре эффект - пестицидлар тәэсире аркасында ДНКга генетик зыян китерү13. Кан күзәнәкләренең морфология анализы - пычрануның мөһим биоиндикаторы һәм матдәнең кыргый төрләргә агулануы29. Микронуклеус тесты - әйләнә-тирәдәге химик матдәләрнең генотоксиклыгын билгеләү өчен иң еш кулланыла торган ысулларның берсе30. Бу тиз, эффектив һәм арзан ысул, амфибияләр 31,32 кебек организмнарның химик пычрануының яхшы күрсәткече һәм генотоксик пычраткыч матдәләр турында мәгълүмат бирә ала33.
Бу тикшерүнең максаты - микронуклеус тесты һәм экологик куркынычны бәяләү ярдәмендә коммерция циперметрин формуляцияләренең кечкенә су тадполларына агулы потенциалын бәяләү.
P. gracilis тадполларының кумулятив үлеме (%) сынауның кискен чорында коммерция циперметринының төрле концентрацияләренә тәэсир итә.
P. gracilis тадполларының кумулятив үлеме (%) хроник сынау вакытында коммерция циперметринының төрле концентрацияләренә тәэсир итә.
Күзәтелгән югары үлем киперметринның (6 һәм 20 μг / Л) төрле концентрацияләренә дучар булган амфибияләрдә генотоксик эффектлар нәтиҗәсе булды, моны эритроцитларда микронуклейлар (MN) һәм атом аномалияләре раслый. МН формалашуы митоздагы хаталарны күрсәтә һәм хромосомаларның микротубулларга начар бәйләнеше, хромосоманы алу һәм ташу өчен җаваплы булган протеин комплексларындагы кимчелекләр, хромосомаларны сегрегацияләүдәге хаталар һәм ДНК зарарлы ремонт 38,39 һәм пестицидлар китереп чыгарган оксидиатив стресс белән бәйле булырга мөмкин40,41. Башка аномальлекләр бәяләнгән барлык концентрацияләрдә күзәтелде. Киперметрин концентрацияләрен арттыру эритроцитлардагы атом аномальлеген 5% һәм 20% ка иң түбән (1 μг / Л) һәм иң югары (20 μg / L) дозада арттырды. Мәсәлән, төрнең ДНКсындагы үзгәрешләр кыска һәм озак яшәү өчен җитди нәтиҗәләргә китерергә мөмкин, нәтиҗәдә халык саны кими, репродуктив фитнес үзгәрә, үрчетү, генетик төрлелекне югалту һәм миграция темплары үзгәрә. Бу факторларның барысы да төрләрнең яшәвенә һәм саклануына тәэсир итә42,43. Эритроид аномалияләренең формалашуы цитокинезда блокны күрсәтергә мөмкин, нәтиҗәдә аномаль күзәнәк бүленеше (бинукле эритроцитлар) 44,45; күп мобиль ядрәләр - берничә лобслы атом мембранасы чыгу, башка эритроид аномальлекләре ДНК көчәйтү белән бәйле булырга мөмкин, мәсәлән, атом бөерләре / бланклар47. Ануклеяцияләнгән эритроцитлар булуы кислород транспортының бозылуын күрсәтергә мөмкин, аеруча пычратылган суда 48,49. Апоптоз күзәнәк үлемен күрсәтә50.
Башка тикшеренүләр шулай ук киперметринның генотоксик эффектларын күрсәттеләр. Кабаа һ.б. P. biligonigerus52 һәм Rhinella arenarum53 дә циперметринга китерелгән апоптоз ачыкланган. Бу нәтиҗәләр киперметринның су организмнарына генотоксик эффектлар булуын һәм MN һәм ENA анализы амфибияләргә сублеталь эффект күрсәткече булырга мөмкин һәм токсикантларга дучар булган туган төрләргә һәм кыргый популяцияләргә кагылырга мөмкин12.
Киперметринның коммерция формулалары әйләнә-тирә мохиткә куркыныч тудыра (кискен дә, хроник та), HQлар АКШ әйләнә-тирә мохитне саклау агентлыгы (EPA) дәрәҗәсеннән артып китә, бу әйләнә-тирә мохиттә булса, төрләргә тискәре йогынты ясарга мөмкин. Хроник рискны бәяләгәндә, үлем өчен NOEC 3 μg L - 1 булган, бу судагы концентрацияләрнең төрләргә куркыныч тудырырга мөмкинлеген раслый55. Эндосульфан һәм циперметрин катнашмасына эләккән Р. аренарум личинкалары өчен үлемгә китерүче NOEC 168 сәгатьтән соң 500 μг L - 1 булган; бу кыйммәт 336 сәгатьтән соң 0.0005 μg L - 1гә кадәр кимеде. Авторлар күрсәтәләр, экспозиция озаграк, төрләргә зарарлы концентрацияләр түбәнрәк. Шулай ук ассызыклау мөһим, NOEC кыйммәтләре шул ук экспозиция вакытында P. gracilisныкыннан югарырак иде, бу төрләрнең киперметринга реакциясенең төрләргә хас булуын күрсәтә. Моннан тыш, үлем ягыннан, P. gracilisның CHQ кыйммәте циперметринга тәэсир иткәннән соң 64,67гә җитте, бу АКШ әйләнә-тирә мохитне саклау агентлыгы билгеләгән бәядән югарырак, һәм Р. аренарум личинкаларының CHQ бәясе дә бу кыйммәттән югарырак иде (CHQ> 388.00 336 с), өйрәнелгән инсектицидларның берничә амфибка зур куркыныч тудырганын күрсәтә. П грацилис метаморфозны тәмамлау өчен якынча 30 көн таләп ителүен исәпкә алып, нәтиҗә ясарга була: киперметринның өйрәнелгән концентрацияләре зарарланган кешеләрнең олы яшьтә яки репродуктив этапка керүен тыеп, халыкның кимүенә китерә ала.
Микронуклейлар һәм башка эритроцитлар атом аномалияләрен исәпләгәндә, CHQ кыйммәтләре 14.92 дән 97.00гә кадәр булган, бу киперметринның P. gracilis өчен табигый яшәү урынында потенциаль генотоксик куркыныч булуын күрсәтә. Alityлемне исәпкә алып, P. gracilisга чыдам ксенобиотик кушылмаларның максималь концентрациясе 4,24 μg L - 1 булган. Ләкин, 1 μг / L кадәр булган концентрацияләр шулай ук генотоксик эффектлар күрсәттеләр. Бу факт аномаль шәхесләр саны артуга китерергә мөмкин57 һәм төрләрнең үсүенә һәм үсүенә тәэсир итә, амфибия популяцияләренең кимүенә китерә.
Инсектицид циперметринының коммерция формулалары P. gracilis өчен югары кискен һәм хроник агулануны күрсәтте. Alityлемнең югары дәрәҗәсе, мөгаен, агулы эффектлар аркасында күзәтелде, моны микронуклейлар һәм эритроцитлар булган атом аномальлекләре раслый, аеруча сератланган ядрәләр, лоблы ядрәләр һәм весикуляр ядрәләр. Моннан тыш, өйрәнелгән төрләр кискен һәм хроник экологик куркынычларның артуын күрсәттеләр. Бу мәгълүматлар, безнең тикшеренү төркемебезнең алдагы тикшеренүләре белән берлектә, киперметринның төрле коммерция формулировкалары әле дә ацетилхолинестераз (AChE) һәм бутирилхолинестераз (BChE) эшчәнлегенең кимүенә һәм оксидиатив стрессның 58 булуын күрсәтте, һәм йөзү эшчәнлегенең үзгәрүенә китерде, П. грацилисның коммерция формулалары бу циперметринның токсиклы булуын күрсәтә. Хартман һ.б. 60 киперметринның коммерция формулировкалары P. gracilis өчен һәм шул ук нәселнең (P. cuvieri) башка тугыз пестицид белән чагыштырганда иң агулы булуын ачыкладылар. Бу шуны күрсәтә: әйләнә-тирә мохитне саклау өчен циперметринның законлы расланган концентрацияләре югары үлемгә һәм халыкның озак вакытка кимүенә китерергә мөмкин.
Пестицидның амфибиялеләргә токсиклылыгын бәяләү өчен өстәмә тикшеренүләр кирәк, чөнки әйләнә-тирә мохиттә булган концентрацияләр югары үлемгә китерергә һәм P. gracilis өчен потенциаль куркыныч тудырырга мөмкин. Амфибия төрләрен тикшерү дәртләндерелергә тиеш, чөнки бу организмнар турында мәгълүмат бик аз, аеруча Бразилия төрләре турында.
Хроник агулану тесты статик шартларда 168 с (7 көн) дәвам итте һәм сублеталь концентрацияләр: 1, 3, 6 һәм 20 μg ai L - 1. Ике экспериментта да дәвалау төркеменә 10 тадполь алты реплика белән бәяләнде, концентрациягә барлыгы 60 тадполь. Шул ук вакытта су белән генә эшкәртү тискәре контроль булып хезмәт итте. Eachәрбер эксперименталь көйләү 500 мл сыйдырышлы стериль пыяла савыттан һәм 50 мл эремәгә тыгызлыгы 1 тадполдан тора. Фласс парга әйләнмәсен өчен полиэтилен пленка белән капланган һәм өзлексез аэрацияләнгән.
Су пестицид концентрациясен 0, 96, һәм 168 сәгатьтә билгеләү өчен химик анализ ясалды. Сабин һ.б. сүзләре буенча. 68 һәм Мартинс һ.б. 69, анализлар Санта Мария Федераль Университетының Пестицидлар анализлау лабораториясендә өчпочмаклы масса спектрометриясенә кушылган газ хроматографиясен кулланып үткәрелде (Вариан моделе 1200, Пало Альто, Калифорния, АКШ). Судагы пестицидларның санлы билгеләнеше өстәмә материал буларак күрсәтелә (SM1 таблицасы).
Микронуклеус тесты (MNT) һәм кызыл күзәнәкнең атом аномальлеге тесты (РНК) өчен, һәр дәвалау төркеменнән 15 тадпол анализланды. Тадпольс 5% лидокаин (50 мг г-170) белән наркозланган һәм кан үрнәкләре бер тапкыр кулланыла торган гепаринизацияләнгән шприцлар ярдәмендә йөрәк тешләре белән җыелган. Кан стериллары стериль микроскоп слайдларында әзерләнгән, һава киптерелгән, 100% метанол (4 ° C) белән 2 минутка тоташтырылган, аннары караңгыда 15 минутка 10% Giemsa эремәсе белән буялган. Процесс ахырында слайдлар дистиллы су белән юылып, артык тапны бетерү өчен һәм бүлмә температурасында киптерделәр.
Eachәрбер тадполдан ким дигәндә 1000 РБК 100 × микроскоп ярдәмендә анализланды, 71 максат белән MN һәм ENA булуын ачыклау. Киперметрин концентрацияләрен һәм контрольләрен исәпкә алып, тадполлардан барлыгы 75,796 РБК бәяләнде. Генотоксиклык Carrasco һ.б. ысулы буенча анализланган. һәм Fenech et al.38,72 түбәндәге атом җәрәхәтләренең ешлыгын билгеләү белән: 2) апоптотик күзәнәкләр: атом фрагментлары, программалы күзәнәк үлеме; 3) бинуклеат күзәнәкләре: ике ядрәле күзәнәкләр; 4. (5) каролизланган күзәнәкләр: эчке материалсыз ядро сызыгы булган күзәнәкләр; (6) киселгән күзәнәкләр: ачыктан-ачык ярыклары булган яфраклары булган күзәнәкләр, шулай ук бөер формасындагы ядрәләр дип атала; (7) лобуляцияләнгән күзәнәкләр: югарыда күрсәтелгән весикулалардан зуррак атом чыгу күзәнәкләре; һәм (8) микроцелллар: конденсацияләнгән ядрәләр һәм цитоплазманы киметкән күзәнәкләр. Changesзгәрешләр тискәре контроль нәтиҗәләр белән чагыштырылды.
Кискен токсиклылык сынау нәтиҗәләре (LC50) GBasic программалары һәм TSK-Trimmed Spearman-Karber ысулы ярдәмендә анализланды74. Хроник тест мәгълүматлары хата нормальлеге (Шапиро-Уилкс) һәм вариантның бер тигезлеге (Бартлетт) өчен алдан сынадылар. Нәтиҗә вариантка берьяклы анализ ясап анализланды (ANOVA). Тукай тесты үзара мәгълүматны чагыштыру өчен кулланылды, һәм Даннет тесты дәвалау төркеме белән тискәре контроль төркем арасындагы мәгълүматны чагыштыру өчен кулланылды.
LOEC һәм NOEC мәгълүматлары Даннет тесты ярдәмендә анализланды. Статистика тестлары Statistica 8.0 программа тәэминаты (StatSoft) ярдәмендә 95% дәрәҗәсендә булган (p <0.05).
Пост вакыты: 13-2025 март