Нарат нематодасы - нарат урманы экосистемаларында зур икътисади югалтулар китерүе билгеле булган карантин миграциячел эндопаразит. Әлеге тикшеренүдә галогенлаштырылган индолларның нарат нематодларына каршы нематицид активлыгы һәм аларның тәэсир итү механизмы карала. 5-йодоиндол һәм авермектинның (уңай контроль) нарат нематодларына каршы нематицид активлыгы охшаш һәм түбән концентрацияләрдә (10 мкг/мл) югары булган. 5-йодоиндол уңдырышлылыкны, репродуктив активлыкны, эмбриональ һәм личинка үлемен һәм хәрәкәтләнү тәртибен киметкән. Лигандларның умырткасызларга хас глутамат белән капланган хлорид канал рецепторлары белән молекуляр үзара бәйләнеше 5-йодоиндолның, авермектин кебек үк, рецепторның актив үзәгенә нык бәйләнүе турындагы фикерне раслый. 5-йодоиндол шулай ук нематодларда төрле фенотипик деформацияләрне китереп чыгарган, шул исәптән аномаль органнарның җимерелүе/кысылуы һәм вакуольләшүнең артуы. Бу нәтиҗәләр вакуольләрнең нематод метилләшүе аркасында үлемдә роль уйнарга мөмкинлеген күрсәтә. Мөһим, 5-йодоиндол ике үсемлек төре өчен дә (кәбестә һәм редис) токсик булмаган. Шулай итеп, бу тикшеренү йодоиндолны әйләнә-тирә мохит шартларында куллану нарат корыган җәрәхәтне контрольдә тота алуын күрсәтә.
Нарат агачы нематодасы (Bursaphelenchus xylophilus) нарат агачы нематодларына (PWN) карый, нарат урманы экосистемаларына җитди экологик зыян китерүе билгеле булган күчмә эндопаразит нематодлар1. Нарат агачы нематодасы китереп чыгарган нарат коры авыруы (PWD) Азия һәм Европаны да кертеп, берничә континентта җитди проблемага әйләнә, ә Төньяк Америкада нематод китерелгән нарат төрләрен юк итә1,2. Нарат агачлары саны кимүе зур икътисади проблема булып тора, һәм аның глобаль таралу перспективалары борчу тудыра3. Түбәндәге нарат төрләре нематода тарафыннан иң еш очрый: Pinus densiflora, Pinus sylvestris, Pinus thunbergii, Pinus koraiensis, Pinus thunbergii, Pinus thunbergii һәм Pinus radiata4. Нарат нематодасы - инфекциядән соң атналар яки айлар эчендә нарат агачларын үтерә алырлык җитди авыру. Моннан тыш, нарат нематодасы таралуы төрле экосистемаларда еш очрый, шуңа күрә инфекциянең даими чылбырлары булдырылган1.
Bursaphelenchus xylophilus - Aphelenchoidea супергаиләсенә һәм 102.5 кладына караган карантинлы үсемлек-паразит нематода. Нематода гөмбә белән туклана һәм нарат агачларының агач тукымаларында үрчи, дүрт төрле личинка стадиясенә үсә: L1, L2, L3, L4 һәм өлкән зат1,6. Азык җитмәү шартларында нарат нематодасы махсуслашкан личинка стадиясенә - dauerга күчә, ул үз векторы - нарат кабыгы коңгызы (Monochamus alternatus) белән паразитлык итә һәм сәламәт нарат агачларына күчә. Сәламәт хуҗаларда нематодалар үсемлек тукымалары аша тиз күчә һәм паренхиматоз күзәнәкләр белән туклана, бу инфекциядән соң бер ел эчендә берничә гиперсизгерлек реакциясенә, нарат шиңүенә һәм үлеменә китерә1,7,8.
Нарат нематодаларына биологик контроль күптәннән бирле катлаулы мәсьәлә булып тора, карантин чаралары XX гасырдан бирле бара. Нарат нематодаларына каршы көрәшнең хәзерге стратегияләре, нигездә, химик эшкәртүләрне үз эченә ала, шул исәптән агачны төтенләү һәм агач төпләренә нематоцидлар урнаштыру. Иң еш кулланыла торган нематоцидлар - авермектин һәм авермектин бензоаты, алар авермектин гаиләсенә карый. Бу кыйммәтле химик матдәләр күп нематода төрләренә каршы бик нәтиҗәле һәм экологик яктан куркынычсыз дип санала9. Ләкин бу нематоцидларны кабат куллану сайлау басымын тудырачак дип көтелә, бу, һичшиксез, чыдам нарат нематодалары барлыкка килүенә китерәчәк, бу Leptinotarsa decemlineata, Plutella xylostella һәм Trichostrongylus colubriformis һәм Ostertagia circumcincta кебек берничә корткыч бөҗәк өчен күрсәтелгәнчә, алар авермектиннарга әкренләп чыдамлык үстерделәр10,11,12. Шуңа күрә, PVD белән көрәшү өчен альтернатив, экономияле һәм экологик яктан чиста чаралар табу максатыннан, каршылык үрнәкләрен даими өйрәнергә һәм нематоцидларны өзлексез тикшерергә кирәк. Соңгы дистә елларда берничә автор үсемлек экстрактларын, эфир майларын һәм очучан матдәләрне нематода белән көрәшү чаралары буларак кулланырга тәкъдим иттеләр13,14,15,16.
Күптән түгел без Caenorhabditis elegans 17дә индолның, күзәнәкара һәм патшалыклар арасындагы сигнал молекуласының, нематоцид активлыгын күрсәттек. Индол - микроб экологиясендә киң таралган күзәнәк эчендәге сигнал, ул микроб физиологиясенә, споралар барлыкка килүенә, плазмидалар тотрыклылыгына, даруларга чыдамлылыкка, биофильм барлыкка килүенә һәм вирулентлыкка тәэсир итүче күпсанлы функцияләрне контрольдә тота 18, 19. Индол һәм аның туындыларының башка патоген нематодаларга каршы активлыгы өйрәнелмәгән. Бу тикшеренүдә без 34 индолның нарат нематодаларына каршы нематоцид активлыгын тикшердек һәм иң көчле 5-йодоиндолның тәэсир итү механизмын микроскопия, вакытлы фотога төшерү һәм молекуляр докинг экспериментлары ярдәмендә ачыкладык, һәм орлык шыту анализы ярдәмендә аның үсемлекләргә токсик йогынтысын бәяләдек.
Индолның югары концентрацияләре (>1,0 мМ) элек нематодаларга нематицид йогынтысы турында хәбәр ителгән иде17. B. xylophilus (катнаш яшәү этаплары) препаратын 1 мМ дозада индол яки 33 төрле индол деривативы белән эшкәрткәннән соң, B. xylophilus үлеме контроль һәм дәвалау төркемнәрендә тере һәм үле нематодаларны санап үлчәнде. Биш индол зур нематицид активлыгы күрсәтте; дәваланмаган контроль төркемнең яшәү дәрәҗәсе 24 сәгатьтән соң 95 ± 7% тәшкил итте. Сыналган 34 индолның 1 мМ дозада 5-йодоиндол һәм 4-фтороиндол 100% үлемгә китерде, ә 5,6-дифториндиго, метилиндол-7-карбоксилат һәм 7-йодоиндол якынча 50% үлемгә китерде (1 нче таблица).
5-йодоиндолның нарат агачы нематодасының вакуоль барлыкка килүенә һәм метаболизмына йогынтысы. (A) Авермектин һәм 5-йодоиндолның өлкән ата нематодларга йогынтысы, (B) L1 стадиядәге нематод йомыркалары һәм (C) B. xylophilus метаболизмы, (i) 0 сәгатьтә вакуольләр күзәтелмәде, дәвалау нәтиҗәсендә (ii) вакуольләр, (iii) күп вакуольләр туплану, (iv) вакуольләр шешенү, (v) вакуольләр кушылу һәм (vi) зур вакуольләр барлыкка килү күзәтелде. Кызыл уклар вакуольләрнең шешенүен, зәңгәр уклар вакуольләр кушылуын, ә кара уклар зур вакуольләр барлыкка килүен күрсәтә. Масштаб сызыгы = 50 мкм.
Моннан тыш, бу тикшеренүдә нарат нематодларында метан китереп чыгарган үлемнең эзлекле процессы да сурәтләнгән (4C рәсем). Метаноген үлем - күренекле цитоплазматик вакуольләр туплану белән бәйле апоптотик булмаган күзәнәк үлеме төре27. Нарат нематодларында күзәтелгән морфологик кимчелекләр метан китереп чыгарган үлем механизмы белән тыгыз бәйләнгән кебек. Төрле вакытларда микроскопик тикшерү күрсәткәнчә, 5-йодоиндол (0,1 мМ) белән 20 сәгать тәэсир иткәннән соң гигант вакуольләр барлыкка килгән. Микроскопик вакуольләр 8 сәгать эшкәртүдән соң күзәтелгән, һәм аларның саны 12 сәгатьтән соң арткан. 14 сәгатьтән соң берничә зур вакуоль күзәтелгән. 12-16 сәгать эшкәртүдән соң берничә кушылган вакуоль ачык күренә, бу вакуоль кушылуының метаноген үлем механизмының нигезе булуын күрсәтә. 20 сәгатьтән соң корт буйлап берничә гигант вакуоль табылган. Бу күзәтүләр C. elegans'та метуоз турында беренче хәбәр итүне күрсәтә.
5-йодоиндол белән эшкәртелгән кортларда вакуоль агрегациясе һәм ярылуы да күзәтелгән (5 нче рәсем), моны кортларның бөгелүе һәм әйләнә-тирә мохиткә вакуольләр чыгуы күрсәтә. Йомырка кабыгы мембранасында да вакуоль бозылуы күзәтелгән, ул гадәттә йомыркадан чыкканда L2 белән бөтен килеш саклана (Өстәмә S2 рәсем). Бу күзәтүләр вакуоль барлыкка килү һәм эренләү процессында сыеклык туплануының һәм осморегуляция җитешсезлегенең, шулай ук кире кайтарыла торган күзәнәк җәрәхәтенең (RCI) катнашуын раслый (5 нче рәсем).
Күзәтелгән вакуоль формалашуында йодның ролен фаразлап, без натрий йодидының (NaI) һәм калий йодидының (KI) нематоцид активлыгын тикшердек. Ләкин, концентрацияләрдә (0,1, 0,5 яки 1 мМ), алар нематодларның яшәвенә дә, вакуоль формалашуына да тәэсир итмәде (Өстәмә S5 рәсем), гәрчә 1 мМ KI бераз нематоцид тәэсиренә ия булса да. Икенче яктан, 7-йодоиндол (1 яки 2 мМ), 5-йодоиндол кебек үк, күп вакуольләр һәм структураль деформацияләр китереп чыгарды (Өстәмә S6 рәсем). Ике йодоиндол да нарат нематодларында охшаш фенотипик үзенчәлекләр күрсәтте, ә NaI һәм KI күрсәтмәде. Кызыклысы шунда ки, индол сыналган концентрацияләрдә B. xylophilus'та вакуоль формалашуын китереп чыгармады (мәгълүматлар күрсәтелмәгән). Шулай итеп, нәтиҗәләр индол-йод комплексының B. xylophilus'ның вакуольләшүе һәм метаболизмы өчен җаваплы булуын раслады.
Нематицид активлыгы тикшерелгән индоллар арасында 5-йодоиндолның иң югары тайпылыш индексы -5,89 ккал/моль тәшкил иткән, аннан соң 7-йодоиндол (-4,48 ккал/моль), 4-фтороиндол (-4,33) һәм индол (-4,03) килә (6 нчы рәсем). 5-йодоиндолның лейцин 218 белән көчле водород бәйләнеше аның бәйләнешен тотрыклыландыра, ә башка барлык индол туындылары серин 260 белән ян чылбырлы водород бәйләнешләре аша бәйләнә. Башка модельләштерелгән йодоиндоллар арасында, 2-йодоиндолның бәйләнеш кыйммәте -5,248 ккал/моль тәшкил итә, бу аның лейцин 218 белән төп водород бәйләнеше белән бәйле. Башка билгеле бәйләнешләргә 3-йодоиндол (-4,3 ккал/моль), 4-йодоиндол (-4,0 ккал/моль) һәм 6-фтороиндол (-2,6 ккал/моль) керә (Өстәмә S8 рәсем). Күпчелек галогенлаштырылган индоллар һәм индол үзе, 5-йодоиндол һәм 2-йодоиндолдан кала, серин 260 белән бәйләнеш барлыкка китерә. Лейцин 218 белән водород бәйләнеше рецептор-лиганд бәйләнешенең нәтиҗәле булуын күрсәтә, ивермектин өчен күзәтелгәнчә (Өстәмә S7 рәсем), 5-йодоиндол һәм 2-йодоиндолның, ивермектин кебек үк, лейцин 218 аша GluCL рецепторының актив үзәгенә нык бәйләнүен раслый (6 рәсем һәм S8 өстәмә рәсем). Без бу бәйләнеш GluCL комплексының ачык пора структурасын саклап калу өчен кирәк дип фаразлыйбыз, һәм GluCL рецепторының актив үзәгенә нык бәйләнү аша 5-йодоиндол, 2-йодоиндол, авермектин һәм ивермектин шулай итеп ион каналын ачык тота һәм сыеклыкның сеңүенә мөмкинлек бирә.
Индол һәм галогенлаштырылган индолның GluCL белән молекуляр бәйләнеше. (A) индол, (B) 4-фториндол, (C) 7-йодоиндол һәм (D) 5-йодоиндол лигандларының GluCL актив үзәгенә бәйләнеш юнәлешләре. Аксым тасма белән күрсәтелгән, ә төп водород бәйләнешләре сары нокталы сызыклар белән күрсәтелгән. (A′), (B′), (C′) һәм (D′) тиешле лигандларның тирә-юньдәге аминокислота калдыклары белән үзара бәйләнешләрен күрсәтә, ә ян чылбырлы водород бәйләнешләре алсу нокталы уклар белән күрсәтелгән.
5-йодоиндолның кәбестә һәм редис орлыкларының шытуына токсик йогынтысын бәяләү өчен экспериментлар үткәрелде. 5-йодоиндол (0,05 яки 0,1 мМ) яки авермектин (10 мкг/мл) башлангыч шытуга һәм үсентеләрнең чыгуына бик аз яки бөтенләй тәэсир итмәде (7 нче рәсем). Моннан тыш, эшкәртелмәгән контроль төркемнең һәм 5-йодоиндол яки авермектин белән эшкәртелгән орлыкларның шыту тизлеге арасында әһәмиятле аерма табылмады. Тамырның озынаюына һәм барлыкка килгән ян тамырлар санына йогынтысы әһәмиятсез иде, гәрчә 5-йодоиндолның 1 мМ (аның актив концентрациясеннән 10 тапкыр артык) ян тамырларның үсешен бераз тоткарласа да. Бу нәтиҗәләр 5-йодоиндолның үсемлек күзәнәкләре өчен токсик түгеллеген һәм өйрәнелгән концентрацияләрдә үсемлекләрнең үсеш процессларына комачауламавын күрсәтә.
5-йодоиндолның орлык шытуына йогынтысы. Мурашиге һәм Скуг агар мохитендә авермектин яки 5-йодоиндол белән яки ансыз B. oleracea һәм R. raphanistrum орлыкларының шытуы, шытуы һәм ян тамырлануы. Шыту 22°C температурада 3 көн инкубациядән соң теркәлгән.
Бу тикшеренүдә индоллар белән нематодаларны үтерүнең берничә очрагы турында хәбәр ителә. Иң мөһиме, бу йодоиндолның нарат энәләрендә метиллашуны (кечкенә вакуольләр туплану нәтиҗәсендә барлыкка килә торган процесс, алар әкренләп зур вакуольләргә кушыла, ахыр чиктә мембрана ярылуына һәм үлемгә китерә) индукцияләүе турында беренче хәбәр, йодоиндол коммерция нематоциды авермектинга охшаш нематицид үзлекләрен күрсәтә.
Индолларның прокариотларда һәм эукариотларда күп сигнал функцияләрен башкаруы турында хәбәр ителгән иде, шул исәптән биофильмны ингибирлау/формалаштыру, бактерияләрнең исән калуы һәм патогенлыгы19,32,33,34. Соңгы вакытта галогенлаштырылган индолларның, индол алкалоидларының һәм ярымсинтетик индол деривативларының потенциаль терапевтик эффектлары киң тикшеренү кызыксынуын җәлеп итте35,36,37. Мәсәлән, галогенлаштырылган индолларның персистент Escherichia coli һәм Staphylococcus aureus күзәнәкләрен үтерүе күрсәтелгән37. Моннан тыш, галогенлаштырылган индолларның башка төрләргә, ыругларга һәм патшалыкларга каршы нәтиҗәлелеген өйрәнү фәнни яктан кызыклы, һәм бу тикшеренү бу максатка ирешү юлында бер адым булып тора.
Монда без C. elegans'та 5-йодоиндол китереп чыгарган үлем механизмын кире кайтарыла торган күзәнәк җәрәхәте (RCI) һәм метиллашуга нигезләнгән тәкъдим итәбез (4C һәм 5 нче рәсемнәр). Шешенү һәм вакуоляр дегенерация кебек шешенү үзгәрешләре RCI һәм метиллашу күрсәткечләре булып тора, алар цитоплазмада зур вакуольләр рәвешендә күренә48,49. RCI энергия җитештерүгә комачаулый, АТФ җитештерүне киметә, АТФаза насосының эшләмәвенә китерә яки күзәнәк мембраналарын боза һәм Na+, Ca2+ һәм суның тиз агымына китерә50,51,52. Хайван күзәнәкләрендә Ca2+ һәм су агымы аркасында цитоплазмада сыеклык туплану нәтиҗәсендә цитоплазма эчендәге вакуольләр барлыкка килә53. Кызыклысы шунда ки, күзәнәк зарарлануының бу механизмы кире кайтарыла ала, әгәр зыян вакытлыча булса һәм күзәнәкләр билгеле бер вакыт эчендә АТФ җитештерә башласа, ләкин зыян дәвам итсә яки начарланса, күзәнәкләр үлә.54 Безнең күзәтүләребез күрсәткәнчә, 5-йодоиндол белән эшкәртелгән нематодалар стресс шартларына дучар булганнан соң нормаль биосинтезны торгыза алмыйлар.
B. xylophilus'та 5-йодоиндол белән индукцияләнгән метиллашу фенотипы йод булу һәм аның молекуляр таралышы белән бәйле булырга мөмкин, чөнки 7-йодоиндол B. xylophilus'ка 5-йодоиндолга караганда азрак ингибитор йогынты ясады (1 нче таблица һәм S6 өстәмә рәсем). Бу нәтиҗәләр өлешчә Maltese et al. (2014) тикшеренүләре белән туры килә, алар индолдагы пиридил азот өлешенең пара- позициядән мета- позициягә күчүе U251 күзәнәкләрендә вакуолизацияне, үсешне тоткарлауны һәм цитотоксиклыкны юкка чыгаруын хәбәр иттеләр, бу молекуланың аксымдагы билгеле бер актив үзәк белән үзара бәйләнеше бик мөһим булуын күрсәтә27,44,45. Бу тикшеренүдә күзәтелгән индол яки галогенлаштырылган индоллар һәм GluCL рецепторлары арасындагы үзара бәйләнешләр дә бу фикерне раслый, чөнки 5- һәм 2-йодоиндолның тикшерелгән башка индолларга караганда GluCL рецепторларына ныграк бәйләнүе ачыкланды (6 нчы рәсем һәм S8 өстәмә рәсем). Индолның икенче яки бишенче позициясендәге йодның GluCL рецепторының лейцин 218 белән төп водород бәйләнешләре аша бәйләнеше ачыкланган, ә башка галогенлаштырылган индоллар һәм индол үзе серин 260 белән зәгыйфь ян чылбырлы водород бәйләнешләре барлыкка китерә (6 нчы рәсем). Шуңа күрә без галогенның локализациясе вакуоляр дегенерацияне индукцияләүдә мөһим роль уйный дип фаразлыйбыз, ә 5-йодоиндолның тыгыз бәйләнеше ион каналын ачык тота, шуның белән сыеклыкның тиз агымына һәм вакуольнең өзелүенә мөмкинлек бирә. Ләкин, 5-йодоиндолның тәэсир итү механизмы әлегә билгеләнмәгән.
5-йодоиндолны гамәли куллану алдыннан, аның үсемлекләргә токсик йогынтысын анализларга кирәк. Орлыкларның шытуы буенча безнең экспериментлар күрсәткәнчә, 5-йодоиндол өйрәнелгән концентрацияләрдә орлыкларның шытуына яки аннан соңгы үсеш процессларына тискәре йогынты ясамаган (7 нче рәсем). Шулай итеп, бу тикшеренү экологик мохиттә нарат нематодаларының нарат агачларына зыянлылыгын контрольдә тоту өчен 5-йодоиндол куллану өчен нигез бирә.
Элегрәк язылган докладларда индолга нигезләнгән терапиянең антибиотикларга каршы тору һәм яман шеш үсеше проблемасын хәл итү өчен потенциаль ысул булуын күрсәттеләр55. Моннан тыш, индоллар антибактериаль, яман шешкә каршы, антиоксидант, ялкынсынуга каршы, диабетка каршы, вирусларга каршы, пролифератив һәм туберкулезга каршы активлыкка ия һәм дарулар эшләү өчен өметле нигез булып хезмәт итә ала56,57. Бу тикшеренү беренче тапкыр йодны паразитларга каршы һәм антигельминтик чара буларак куллану мөмкинлеген күрсәтә.
Авермектин өч дистә ел элек ачылган һәм 2015 елда Нобель премиясенә лаек булган, һәм аны антигельминтик буларак куллану әле дә актив дәвам итә. Ләкин, нематодаларда һәм корткыч бөҗәкләрдә авермектиннарга каршы торучанлык тиз үсеш алу сәбәпле, нарат агачларында PWN инфекциясен контрольдә тоту өчен альтернатив, арзан һәм экологик яктан чиста стратегия кирәк. Бу тикшеренүдә шулай ук 5-йодоиндолның нарат нематодаларын ничек үтерү механизмы һәм 5-йодоиндолның үсемлек күзәнәкләре өчен түбән токсиклыгы турында да хәбәр ителә, бу аны киләчәктә коммерция куллану өчен яхшы перспективалар ача.
Барлык экспериментлар да Кореянең Кёнсан шәһәрендәге Йонгнам университетының Этика комитеты тарафыннан расланган, һәм методлар Йонгнам университетының Этика комитеты күрсәтмәләренә туры китереп башкарылган.
Йомырка инкубациясе тәҗрибәләре билгеләнгән процедуралар ярдәмендә үткәрелде43. Чәчәк ату тизлеген (HR) бәяләү өчен, 1 көнлек өлкән нематодалар (якынча 100 ана һәм 100 ата) гөмбәчекле Петри чынаякларына күчерелде һәм 24 сәгать үстерелде. Аннары йомыркалар аерып алынды һәм стериль дистилляцияләнгән суда суспензия буларак 5-йодоиндол (0,05 мМ һәм 0,1 мМ) яки авермектин (10 мкг/мл) белән эшкәртелде. Бу суспензияләр (500 мкл; якынча 100 йомырка) 24 чокырлы тукыма культурасы пластинасының чокырларына күчерелде һәм 22 °C температурада инкубацияләнде. L2 санаулары 24 сәгать инкубациядән соң ясалды, ләкин нечкә платина чыбык белән стимуллаштырганда күзәнәкләр хәрәкәтләнмәсә, үле дип саналды. Бу тәҗрибә ике этапта үткәрелде, һәрберсе алты тапкыр кабатланды. Ике тәҗрибәдән дә мәгълүматлар берләштерелде һәм тәкъдим ителде. HR проценты түбәндәгечә исәпләнә:
Личинкаларның үлеме алдан эшләнгән процедуралар ярдәмендә бәяләнде. Нематода йомыркалары җыелды һәм эмбрионнар стериль дистилляцияләнгән суда чыгарылып, L2 стадиясендәге личинкалар барлыкка килде. Синхронлаштырылган личинкалар (якынча 500 нематода) 5-йодоиндол (0,05 мМ һәм 0,1 мМ) яки авермектин (10 мкг/мл) белән эшкәртелде һәм B. cinerea Petri пластинкаларында үстерелде. 22 °C температурада 48 сәгать инкубациядән соң, нематодалар стериль дистилляцияләнгән суда җыелды һәм L2, L3 һәм L4 стадияләренең булуын тикшерелде. L3 һәм L4 стадияләренең булуы личинка трансформациясен күрсәтте, ә L2 стадиясенең булуы трансформациянең булмавын күрсәтте. Рәсемнәр iRiS™ санлы күзәнәк сурәтләү системасы ярдәмендә алынды. Бу эксперимент ике этапта үткәрелде, һәрберсе алты тапкыр кабатланды. Ике эксперименттан да мәгълүматлар берләштерелде һәм тәкъдим ителде.
5-йодоиндол һәм авермектинның орлыкларга токсиклыгы Мурашиге һәм Скоог агар пластинкаларында үсү тестлары ярдәмендә бәяләнде.62 B. oleracea һәм R. raphanistrum орлыклары башта бер көн стериль дистилляцияләнгән суда чылатылды, 1 мл 100% этанол белән юылды, 1 мл 50% коммерция агарткычы (3% натрий гипохлориты) белән 15 минут стерильләштерелде һәм 1 мл стериль су белән биш тапкыр юылды. Аннары стерильләштерелгән орлыклар 0,86 г/л (0,2X) Мурашиге һәм Скоог мохите һәм 0,7% бактериологик агар 5-йодоиндол яки авермектин белән яки ансыз булган үсү агары пластинкаларына басылды. Аннары пластинкалар 22 °C температурада инкубацияләнде, һәм 3 көн инкубациядән соң рәсемнәр төшерелде. Бу эксперимент ике этапта үткәрелде, аларның һәрберсендә алты тапкыр кабатлау булды.
Бастырып чыгару вакыты: 2025 елның 26 феврале