Nature.com сайтына кергәнегез өчен рәхмәт. Сез куллана торган браузер версиясендә CSS ярдәме чикләнгән. Иң яхшы нәтиҗәләргә ирешү өчен, без сезгә браузерыгызның яңарак версиясен кулланырга киңәш итәбез (яки Internet Explorer'да туры килүчәнлек режимын сүндерегез). Шуңа кадәр, даими ярдәм күрсәтү өчен, без сайтны стильләштермичә яки JavaScriptсыз күрсәтәбез.
Үсемлекләрдән алынган инсектицид кушылмалары корткычларга каршы синергетик яки антагонистик үзара тәэсир итешергә мөмкин. Aedes чебеннәре тараткан авыруларның тиз таралуын һәм Aedes чебен популяцияләренең традицион инсектицидларга каршы торучанлыгы артуын исәпкә алып, үсемлек эфир майларына нигезләнгән терпен кушылмаларының егерме сигез комбинациясе формалаштырылды һәм Aedes aegypti личинка һәм өлгергән стадияләренә каршы сыналды. Башта биш үсемлек эфир мае (EO) личинка һәм өлгергәнлек нәтиҗәлелеге өчен бәяләнде, һәм һәр EOда GC-MS нәтиҗәләре нигезендә ике төп кушылма билгеләнде. Төп ачыкланган кушылмалар сатып алынды, атап әйткәндә, диалил дисульфид, диалил трисульфид, карвон, лимонен, эвгенол, метил эвгенол, эвкалиптол, эвдесмол һәм чебен альфа-пинен. Аннары бу кушылмаларның икеле кушылмалары сублеталь дозалар кулланып әзерләнде һәм аларның синергетик һәм антагонистик йогынтысы тикшерелде һәм билгеләнде. Иң яхшы личинкаларга каршы составлар лимоненны диалил дисульфиды белән кушу юлы белән, ә иң яхшы өлкәннәргә каршы составлар карвонны лимонен белән кушу юлы белән алына. Коммерция максатларында кулланыла торган синтетик личинкаларга каршы препарат Temphos һәм өлкәннәр өчен Malathion аерым һәм терпеноидлар белән икеләтә комбинацияләрдә сынап каралды. Нәтиҗәләр темепос һәм диалил дисульфиды, шулай ук малатион һәм эудесмол комбинациясенең иң нәтиҗәле комбинация булуын күрсәтте. Бу көчле комбинацияләр Aedes aegypti'га каршы куллану өчен потенциаль.
Үсемлек эфир майлары (ҮЭ) - төрле биоактив кушылмаларны үз эченә алган икенчел метаболитлар һәм синтетик пестицидларга альтернатива буларак мөһимрәк була бара. Алар экологик яктан чиста һәм кулланучылар өчен уңайлы гына түгел, ә төрле биоактив кушылмалар катнашмасы да, бу шулай ук даруларга каршы торучанлык үсеш ихтималын киметә1. GC-MS технологиясен кулланып, тикшеренүчеләр төрле үсемлек эфир майларының составларын тикшерделәр һәм 17 500 ароматлы үсемлектән 3000 нән артык кушылманы ачыкладылар2, аларның күбесе инсектицид үзлекләренә тикшерелде һәм инсектицид тәэсиренә ия дип хәбәр ителә3,4. Кайбер тикшеренүләр кушылманың төп компонентының токсиклыгы аның чи этилен оксиды белән бер үк яки аннан да күбрәк булуын күрсәтә. Ләкин аерым кушылмаларны куллану, химик инсектицидлардагы кебек үк, каршы торучанлык үсешенә урын калдырырга мөмкин5,6. Шуңа күрә, хәзерге вакытта игътибар инсектицид нәтиҗәлелеген арттыру һәм максатчан корткыч популяцияләрендә каршы торучанлык ихтималын киметү өчен этилен оксиды нигезендәге кушылмалар катнашмаларын әзерләүгә юнәлтелгән. Эфир майларында булган аерым актив кушылмалар Эфир майларының гомуми активлыгын чагылдыручы комбинацияләрдә синергетик яки антагонистик йогынты ясарга мөмкин, бу факт элеккеге тикшеренүчеләр тарафыннан үткәрелгән тикшеренүләрдә яхшы ассызыкланган7,8. Векторларны контрольдә тоту программасына шулай ук Эфир майлары һәм аның компонентлары керә. Эфир майларының чиркейләргә каршы активлыгы Culex һәм Anopheles чиркейләрендә киң өйрәнелде. Берничә тикшеренүдә төрле үсемлекләрне коммерция максатларында кулланыла торган синтетик пестицидлар белән берләштереп, гомуми токсиклыкны арттыру һәм ян эффектларны минимальләштерү юлы белән нәтиҗәле пестицидлар эшләү омтылышы ясалды9. Ләкин Aedes aegypti каршы мондый кушылмаларны өйрәнү сирәк булып кала. Медицина фәнендәге казанышлар һәм дарулар һәм вакциналар эшләү кайбер векторлар аша тарала торган авырулар белән көрәшергә ярдәм итте. Ләкин Aedes aegypti чиркейләре тарафыннан тарала торган вирусның төрле серотиплары булуы вакцинация программаларының уңышсызлыгына китерде. Шуңа күрә, мондый авырулар булганда, векторларны контрольдә тоту программалары авыруның таралуын булдырмауның бердәнбер ысулы булып тора. Хәзерге сценарийда Aedes aegypti вирусын контрольдә тоту бик мөһим, чөнки ул төрле вирусларның һәм аларның серотипларының төп векторы булып тора, алар денге бизгәге, Зика бизгәге, денге геморрагик бизгәге, сары бизгәк һ.б. китереп чыгара. Иң игътибарга лаеклысы - вектор аша күчә торган Aedes авыруларының барлык диярлек очраклары Мисырда һәм бөтен дөньяда елдан-ел арта бара. Шуңа күрә, бу контекстта, Aedes aegypti популяцияләре өчен экологик яктан чиста һәм нәтиҗәле контроль чараларын эшләү зарурлыгы туа. Бу яктан потенциаль кандидатлар - EO, аларның составындагы кушылмалар һәм аларның комбинацияләре. Шуңа күрә бу тикшеренүдә Aedes aegypti вирусына каршы инсектицид үзлекләренә ия булган биш үсемлектән (мәсәлән, ялкау, изге базилик, эвкалипт таплары, аллиум күкерт һәм мелалеука) төп үсемлек EO кушылмаларының нәтиҗәле синергетик комбинацияләрен ачыкларга тырышылды.
Барлык сайланган EO'лар да Aedes aegypti'га каршы потенциаль ларвицид активлыгы күрсәттеләр, 24 сәгатьлек LC50 0,42 дән 163,65 ppm га кадәр булды. Иң югары ларвицид активлыгы бөтнек (Mp) EO'да теркәлде, 24 сәгать эчендә LC50 кыйммәте 0,42 ppm тәшкил итте, аннан соң сарымсак (As) 24 сәгать эчендә LC50 кыйммәте 16,19 ppm тәшкил итте (1 нче таблица).
Ocimum Sainttum, Os EO'дан кала, башка дүрт тикшерелгән EO'ның барысы да ачык аллерцид йогынтысын күрсәтте, LC50 кыйммәтләре 24 сәгатьлек тәэсир итү чорында 23,37 дән 120,16 ppm га кадәр булды. Thymophilus striata (Cl) EO'сы тәэсир иткәннән соң 24 сәгать эчендә LC50 кыйммәте 23,37 ppm булган олыларны үтерүдә иң нәтиҗәле булды, аннан соң LC50 кыйммәте 101,91 ppm булган Eucalyptus maculata (Em) килә (1 нче таблица). Икенче яктан, Os өчен LC50 кыйммәте әлегә билгеләнмәгән, чөнки иң югары дозада иң югары үлем күрсәткече 53% теркәлгән (Өстәмә 3 нче рәсем).
Һәр EO составындагы ике төп кушылма NIST китапханәсе мәгълүмат базасы нәтиҗәләренә, GC хроматограммасы мәйданы процентына һәм MS спектрлары нәтиҗәләренә нигезләнеп билгеләнде һәм сайланды (2 нче таблица). EO As өчен, ачыкланган төп кушылмалар диалилдисульфид һәм диалилтрисульфид иде; EO Mp өчен ачыкланган төп кушылмалар карвон һәм лимонен, EO Em өчен ачыкланган төп кушылмалар эудесмол һәм эвкалиптол иде; EO Os өчен ачыкланган төп кушылмалар эвгенол һәм метил эвгенол, ә EO Cl өчен ачыкланган төп кушылмалар эвгенол һәм α-пинен иде (1 нче рәсем, 5–8 нче өстәмә рәсемнәр, 1–5 нче өстәмә таблица).
Сайланган эфир майларының төп терпеноидларының масса-спектрометрия нәтиҗәләре (А-диаллилдисульфид; В-диаллил трисульфид; С-эвгенол; D-метил эвгенол; Е-лимонен; F-ароматик цеперон; G-α-пинен; H-цинол; R-эвдамол).
Барлыгы тугыз кушылма (диалил дисульфид, диалил трисульфид, эвгенол, метил эвгенол, карвон, лимонен, эвкалиптол, эвдесмол, α-пинен) EO төп компонентлары булган нәтиҗәле кушылмалар буларак билгеләнде һәм личинка стадиясендә Aedes aegyptiга каршы аерым биоанализланды. Эудесмол кушылмасы иң югары личинкага каршы активлыкка ия булды, LC50 кыйммәте 24 сәгать тәэсир иткәннән соң 2,25 ppm тәшкил итте. Диалил дисульфид һәм диалил трисульфид кушылмаларының да потенциаль личинкага каршы эффектлары барлыгы ачыкланды, уртача сублеталь дозалары 10–20 ppm диапазонында. Евгенол, лимонен һәм эвкалиптол кушылмалары өчен уртача личинкага каршы активлык тагын күзәтелде, LC50 кыйммәтләре 63,35 ppm, 139,29 ppm тәшкил итте. һәм 24 сәгатьтән соң 181,33 ppm (3 нче таблица). Ләкин, метил эвгенол һәм карвонның хәтта иң югары дозаларда да ларвицид потенциалы ачыкланмады, шуңа күрә LC50 кыйммәтләре исәпләнмәде (3 нче таблица). Синтетик ларвицид Temephos 24 сәгатьлек тәэсир итү вакытында Aedes aegyptiга каршы уртача үлемгә китерә торган концентрациясе 0,43 ppm тәшкил итте (3 нче таблица, 6 нчы өстәмә таблица).
Нәтиҗәле EO төп кушылмалары буларак җиде кушылма (диалил дисульфид, диалил трисульфид, эвкалиптол, α-пинен, эудесмол, лимонен һәм карвон) билгеләнде һәм олы Мисыр Aedes чебеннәренә каршы аерым тикшерелде. Probit регрессия анализы буенча, Эудесмолның LC50 кыйммәте 1,82 ppm булган иң югары потенциалга ия булуы ачыкланды, аннан соң 24 сәгатьлек экспозиция вакытында LC50 кыйммәте 17,60 ppm булган Эукалиптол килә. Сыналган калган биш кушылма LC50 140,79 дан 737,01 ppm га кадәр булган олы кешеләр өчен уртача зыянлы иде (3 нче таблица). Синтетик органофосфор малятионы эудесмолга караганда азрак көчле һәм башка алты кушылмага караганда югарырак иде, 24 сәгатьлек экспозиция вакытында LC50 кыйммәте 5,44 ppm иде (3 нче таблица, 6 нчы өстәмә таблица).
LC50 дозаларының 1:1 нисбәтендәге икеләтә комбинацияләрен формалаштыру өчен җиде көчле кургаш кушылмасы һәм органофосфор тамефосат сайланган. Барлыгы 28 икеләтә комбинация әзерләнгән һәм аларның Aedes aegypti'га каршы ларвицид нәтиҗәлелеге тикшерелгән. Тугыз комбинация синергетик, 14 комбинация антагонистик, ә биш комбинация ларвицид түгел дип табылган. Синергетик комбинацияләр арасында диалил дисульфид һәм темофол комбинациясе иң нәтиҗәле булган, 24 сәгатьтән соң 100% үлем күзәтелгән (4 нче таблица). Шулай ук, лимоненның диалил дисульфид белән һәм эвгенолның тиметфос белән катнашмалары яхшы потенциал күрсәткән, ларвина үлеме 98,3% тәшкил иткән (5 нче таблица). Калган 4 комбинация, атап әйткәндә, эудесмол һәм эвкалиптол, эудесмол һәм лимонен, эвкалиптол һәм альфа-пинен, альфа-пинен һәм темофос, шулай ук ларвицид эффективлыгының сизелерлек булуын күрсәтте, үлем күрсәткечләре 90% тан артып китте. Көтелгән үлем күрсәткече 60-75% ка якын (4 нче таблица). Ләкин, лимоненның α-пинен яки эвкалипт белән кушылуы антагонистик реакцияләр күрсәтте. Шулай ук, Темефосның эвгенол яки эвкалипт яки эудесмол яки диалил трисульфид белән кушылмалары антагонистик эффектларга ия булуы ачыкланды. Шулай ук, диалил дисульфид һәм диалил трисульфидның кушылмасы һәм бу кушылмаларның теләсә кайсысының эудесмол яки эвгенол белән кушылуы ларвицид тәэсирендә антагонистик. Эудесмолның эвгенол яки α-пинен белән кушылуы белән дә антагонизм турында хәбәр ителде.
Өлкәннәрнең кислота активлыгы өчен сыналган барлык 28 бинар катнашманың 7се синергетик, 6сы бернинди дә йогынты ясамаган, ә 15е антагонистик булган. Эвдесмолның эвкалипт белән һәм лимоненның карвон белән катнашмалары башка синергетик кушылмаларга караганда нәтиҗәлерәк булып чыккан, үлем күрсәткечләре 24 сәгатьтә 76% һәм 100% тәшкил иткән (5 нче таблица). Малатионның лимонен һәм диалил трисульфидтан кала барлык кушылмаларның кушылмалары белән синергетик эффект күрсәтүе күзәтелгән. Икенче яктан, диалил дисульфид һәм диалил трисульфид һәм аларның теләсә кайсысының эвкалипт, яки эвкалиптол, яки карвон, яки лимонен белән кушылуы арасында антагонизм табылган. Шулай ук, α-пиненның эудесмол яки лимонен белән, эвкалиптолның карвон яки лимонен белән һәм лимоненның эудесмол яки малатион белән кушылмалары антагонистик ларвицид эффектлары күрсәткән. Калган алты комбинация өчен көтелгән һәм күзәтелгән үлем очраклары арасында әһәмиятле аерма булмады (5 нче таблица).
Синергетик эффектларга һәм сублеталь дозаларга нигезләнеп, аларның күп санлы Aedes aegypti чебеннәренә каршы ларвицид токсиклыгы сайланды һәм алга таба тикшерелде. Нәтиҗәләр күрсәткәнчә, эвгенол-лимонен, диалил дисульфид-лимонен һәм диалил дисульфид-тимофос бинар комбинацияләрен кулланып күзәтелгән личинка үлеме 100% тәшкил иткән, ә көтелгән личинка үлеме 76,48%, 72,16% һәм 63,4% тәшкил иткән (6 нчы таблица). . Лимонен һәм эудесмол комбинациясе чагыштырмача аз нәтиҗәле булган, 24 сәгатьлек тәэсир итү чорында 88% личинка үлеме күзәтелгән (6 нчы таблица). Кыскасы, сайланган дүрт бинар комбинация зур күләмдә кулланылганда Aedes aegyptiга каршы синергетик ларвицид эффектларын да күрсәткән (6 нчы таблица).
Өлкән Aedes aegypti популяцияләренең зур популяцияләрен контрольдә тоту өчен өч синергетик комбинация сайланды. Зур бөҗәк колонияләрендә сынау өчен комбинацияләрне сайлау өчен без башта ике иң яхшы синергетик терпен комбинациясенә игътибар иттек, атап әйткәндә, карвон + лимонен һәм эвкалиптол + эудесмол. Икенчедән, иң яхшы синергетик комбинация синтетик органофосфат малатионы һәм терпеноидлар комбинациясеннән сайланды. Без малатион һәм эудесмол комбинациясе зур бөҗәк колонияләрендә сынау өчен иң яхшы комбинация дип саныйбыз, чөнки кандидат ингредиентларның үлем күрсәткече иң югары һәм LC50 кыйммәтләре бик түбән. Малатион α-пинен, диалил дисульфид, эвкалипт, карвон һәм эудесмол белән берлектә синергизм күрсәтә. Әмма LC50 кыйммәтләренә карасак, Эудесмол иң түбән кыйммәткә ия (2,25 ppm). Малатион, α-пинен, диалил дисульфид, эвкалиптол һәм карвонның исәпләнгән LC50 кыйммәтләре 5,4, 716,55, 166,02, 17,6 һәм 140,79 ppm тәшкил итте. Бу кыйммәтләр малатион һәм эудесмол комбинациясенең дозасы ягыннан оптималь комбинация булуын күрсәтә. Нәтиҗәләр күрсәткәнчә, карвон һәм лимонен һәм эудесмол һәм малатион комбинацияләрендә үлем күрсәткече 100% тәшкил иткән, көтелгән үлем күрсәткече 61% тан 65% ка кадәр булган. Тагын бер комбинация, эудесмол һәм эвкалиптол, 24 сәгать тәэсир иткәннән соң үлем күрсәткече 78,66% тәшкил иткән, көтелгән үлем күрсәткече 60% булган. Сайланган өч комбинация дә олы Aedes aegyptiга каршы зур күләмдә кулланылганда да синергетик эффектлар күрсәткән (6 нчы таблица).
Бу тикшеренүдә Mp, As, Os, Em һәм Cl кебек сайланган үсемлек EOлары Aedes aegypti личинка һәм өлкән стадияләренә өметле үлемечле йогынты ясады. Mp EO личинкаларны үтерү өчен иң югары активлыкка ия булды, LC50 кыйммәте 0,42 ppm тәшкил итте, аннан соң As, Os һәм Em EOлары 24 сәгатьтән соң LC50 кыйммәте 50 ppm дан кимрәк булды. Бу нәтиҗәләр чебеннәр һәм башка диптера чебеннәре белән үткәрелгән алдагы тикшеренүләр белән туры килә10,11,12,13,14. Cl личинкаларны үтерү көче башка эфир майларына караганда түбәнрәк булса да, 24 сәгатьтән соң LC50 кыйммәте 163,65 ppm булса да, аның өлкән потенциалы иң югары, LC50 кыйммәте 24 сәгатьтән соң 23,37 ppm тәшкил итә. Mp, As һәм Em EO'лар шулай ук 24 сәгатьлек тәэсирдә LC50 кыйммәтләре белән 100–120 ppm диапазонында яхшы аллерцид потенциалы күрсәттеләр, ләкин аларның личинкага каршы нәтиҗәлелегеннән чагыштырмача түбәнрәк иде. Икенче яктан, EO O'лар хәтта иң югары терапевтик дозада да сизелерлек аллерцид эффекты күрсәттеләр. Шулай итеп, нәтиҗәләр этилен оксидының үсемлекләр өчен токсиклыгы чебеннәрнең үсеш стадиясенә карап үзгәрергә мөмкин икәнен күрсәтә15. Бу шулай ук EO'ларның бөҗәк организмына үтеп керү тизлегенә, аларның билгеле бер максатчан ферментлар белән үзара бәйләнешенә һәм һәр үсеш стадиясендә чебеннең детоксикация сәләтенә бәйле16. Күп санлы тикшеренүләр күрсәткәнчә, төп компонент кушылмасы этилен оксидының биологик активлыгында мөһим фактор булып тора, чөнки ул барлык кушылмаларның күпчелек өлешен тәшкил итә3,12,17,18. Шуңа күрә без һәр EO'да ике төп кушылманы карадык. GC-MS нәтиҗәләренә нигезләнеп, диалил дисульфид һәм диалил трисульфид EO As төп кушылмалары буларак билгеләнде, бу алдагы докладлар белән туры килә19,20,21. Элегрәк докладларда ментол аның төп кушылмаларының берсе булуы күрсәтелсә дә, карвон һәм лимонен янә Mp EO22,23 төп кушылмалары буларак билгеләнде. Os EO состав профиле эвгенол һәм метил эвгенолның төп кушылмалар булуын күрсәтте, бу алдагы тикшеренүчеләрнең нәтиҗәләренә охшаш16,24. Эвкалиптол һәм эвкалиптол Em яфрагы маенда булган төп кушылмалар буларак хәбәр ителде, бу кайбер тикшеренүчеләрнең нәтиҗәләре белән туры килә25,26, ләкин Олаладе һ.б.ның нәтиҗәләренә каршы килә27. Мелалеука эфир маенда цинол һәм α-пиненның өстенлек итүе күзәтелде, бу алдагы тикшеренүләргә охшаш28,29. Төрле урыннарда бер үк үсемлек төрләреннән алынган эфир майларының составында һәм концентрациясендә төр эчендәге аермалар турында хәбәр ителде һәм бу тикшеренүдә дә күзәтелде, алар географик үсемлекләрнең үсеш шартларына, уңыш җыю вакытына, үсеш этабына яки үсемлек яшенә бәйле. 22,30,31,32. Аннары ачыкланган төп кушылмалар сатып алынды һәм аларның личинкаларга каршы тәэсире һәм олы Aedes aegypti чебеннәренә йогынтысы тикшерелде. Нәтиҗәләр диалил дисульфидның личинкаларга каршы активлыгы чимал EO As белән чагыштырырлык булуын күрсәтте. Ләкин диалил трисульфидның активлыгы EO As белән чагыштырганда югарырак. Бу нәтиҗәләр Kimbaris һ.б. 33 тарафыннан Culex philippines буенча алынган нәтиҗәләргә охшаш. Ләкин бу ике кушылма максатлы чебеннәргә каршы яхшы автоцид активлыгы күрсәтмәде, бу Plata-Rueda һ.б. 34нең Tenebrio molitor буенча нәтиҗәләре белән туры килә. Os EO Aedes aegypti личинка стадиясенә каршы нәтиҗәле, ләкин олы стадиягә каршы түгел. Төп аерым кушылмаларның ларвицид активлыгы чимал Os EOга караганда түбәнрәк булуы ачыкланган. Бу башка кушылмаларның һәм аларның чимал этилен оксидындагы үзара бәйләнешләренең ролен күрсәтә. Метил эвгенол үзе генә дә бик аз активлыкка ия, ә эвгенол үзе генә дә уртача ларвицид активлыгына ия. Бу нәтиҗә, бер яктан,35,36 раслый, ә икенче яктан, элеккеге тикшеренүчеләрнең37,38 нәтиҗәләренә каршы килә. Эвгенол һәм метилеугенолның функциональ төркемнәрендәге аермалар бер үк максатлы бөҗәк өчен төрле токсиклыкка китерергә мөмкин39. Лимоненның уртача ларвицид активлыгы барлыгы ачыкланган, ә карвонның йогынтысы әһәмиятсез булган. Шулай ук, лимоненның өлкән бөҗәкләр өчен чагыштырмача түбән токсиклыгы һәм карвонның югары токсиклыгы кайбер алдагы тикшеренүләрнең нәтиҗәләрен раслый40, ләкин башкаларына каршы килә41. Икеләтә бәйләнешләрнең цикл эчендәге һәм экзоциклик позицияләрдә булуы бу кушылмаларның ларвицидлар буларак файдасын арттырырга мөмкин3,41, ә туендырылмаган альфа һәм бета углеродлы кетон булган карвон өлкәннәрдә югарырак токсиклык потенциалы күрсәтергә мөмкин42. Ләкин лимонен һәм карвонның индивидуаль үзенчәлекләре гомуми EO MP дан күпкә түбәнрәк (1 нче таблица, 3 нче таблица). Сыналган терпеноидлар арасында эудесмолның 2,5 ppm дан түбән LC50 кыйммәте белән иң зур ларвицид һәм өлкәннәр өчен активлыгы ачыкланган, бу аны Aedes чебеннәрен контрольдә тоту өчен өметле кушылма итә. Аның эшчәнлеге бөтен EO Em га караганда яхшырак, гәрчә бу Ченг һ.б.40 нәтиҗәләре белән туры килмәсә дә. Эудесмол - эвкалипт кебек кислородлы монотерпеннарга караганда азрак очучан һәм шуңа күрә пестицид буларак зуррак потенциалга ия ике изопрен берәмлекле сесквитерпен. Эвкалиптол үзе личинкаларга караганда өлкәннәргә каршы активлыкка ия, һәм алдагы тикшеренүләр нәтиҗәләре моны раслый да, кире кага да37,43,44. Активлык үзе генә дә бөтен EO Cl белән чагыштырырлык диярлек. Тагын бер бициклик монотерпен, α-пинен, Aedes aegyptiга өлкәннәргә каршы йогынтысы личинкаларга каршы йогынтыдан кимрәк, бу тулы EO Cl йогынтысына капма-каршы. Терпеноидларның гомуми инсектицид активлыгына аларның липофильлеге, үзгәрүчәнлеге, углерод тармаклануы, проекция мәйданы, өслек мәйданы, функциональ төркемнәре һәм аларның позицияләре тәэсир итә45,46. Бу кушылмалар күзәнәк туплануларын юк итү, сулыш алу эшчәнлеген блоклау, нерв импульслары тапшыруын өзү һ.б. аша тәэсир итә ала.47 Синтетик органофосфат Темефосның иң югары личинкаларга каршы активлыгы ачыкланды, LC50 кыйммәте 0,43 ppm тәшкил итә, бу Лек мәгълүматлары белән туры килә - Utala48. Синтетик органофосфор малятионының өлкәннәргә каршы активлыгы 5,44 ppm дип хәбәр ителде. Бу ике органофосфат Aedes aegypti лаборатория штаммнарына уңай җавап бирсә дә, дөньяның төрле почмакларында бу кушылмаларга чиркейләрнең чыдамлыгы турында хәбәр ителгән49. Ләкин үлән даруларына чыдамлык үсеше турында охшаш хәбәрләр табылмаган50. Шулай итеп, ботаник препаратлар векторларны контрольдә тоту программаларында химик пестицидларга потенциаль альтернатива буларак карала.
Личинкаларга каршы эффект көчле терпеноидлардан һәм тиметфослы терпеноидлардан әзерләнгән 28 бинар комбинациядә (1:1) тикшерелде, һәм 9 комбинация синергетик, 14 антагонистик һәм 5 антагонистик булып чыкты. Тәэсир юк. Икенче яктан, олыларның потенциал биоанализында 7 комбинация синергетик, 15 комбинация антагонистик, ә 6 комбинациянең бернинди дә тәэсире булмавы турында хәбәр ителде. Кайбер комбинацияләрнең синергетик эффект бирү сәбәбе кандидат кушылмаларның төрле мөһим юлларда бер үк вакытта үзара бәйләнештә булуы яки билгеле бер биологик юлның төрле төп ферментларының эзлекле ингибирлавы белән бәйле булырга мөмкин51. Лимоненның диалил дисульфид, эвкалипт яки эвгенол белән кушылуы кечкенә һәм зур күләмле кушымталарда синергетик булып чыкты (6 нчы таблица), ә аның эвкалипт яки α-пинен белән кушылуы личинкаларга антагонистик йогынты ясый дип табылды. Уртача алганда, лимонен яхшы синергист булып күренә, мөгаен, метил төркемнәренең булуы, мөгезкатлау катламына яхшы үтеп керүе һәм төрле тәэсир итү механизмы аркасында52,53. Элегрәк лимоненның бөҗәк кутикулаларына үтеп кереп (контакт токсиклыгы), ашкайнату системасына тәэсир итү (антифидант) яки сулыш алу системасына тәэсир итү (фумигация активлыгы) аркасында токсик йогынты ясарга мөмкинлеге турында хәбәр ителгән иде,54 ә эвгенол кебек фенилпропаноидлар метаболик ферментларга тәэсир итәргә мөмкин55. Шуңа күрә, төрле тәэсир итү механизмнары булган кушылмаларның комбинацияләре катнашманың гомуми үлемечле йогынтысын арттырырга мөмкин. Эвкалиптолның диалил дисульфид, эвкалипт яки α-пинен белән синергетик булуы ачыкланды, ләкин башка кушылмалар белән башка комбинацияләр я ларвицид түгел, я антагонистик булды. Баштагы тикшеренүләр эвкалиптолның ацетилхолинэстеразага (AChE), шулай ук октаамин һәм GABA рецепторларына56 ингибитор активлыгы булуын күрсәтте. Циклик монотерпеннар, эвкалиптол, эвгенол һ.б. нейротоксик активлыгы белән бер үк тәэсир итү механизмына ия булырга мөмкин,57 шуның белән үзара ингибирлау аша аларның берләштерелгән йогынтысын минимальләштерә. Шулай ук, Темефосны диалил дисульфид, α-пинен һәм лимонен белән кушу синергетик булып чыкты, бу үлән продуктлары һәм синтетик органофосфатлар арасында синергетик йогынты турындагы элеккеге хәбәрләрне раслый58.
Эудесмол һәм эвкалиптол кушылмасы Aedes aegypti личинка һәм өлкән стадияләренә синергетик йогынты ясый дип табылды, бу, мөгаен, аларның төрле химик структуралары аркасында төрле тәэсир итү ысуллары белән бәйле. Эудесмол (сесквитерпен) сулыш системасына 59 тәэсир итә ала, ә эвкалиптол (монотерпен) ацетилхолинэстеразага 60 тәэсир итә ала. Ингредиентларны ике яки аннан да күбрәк максатчан урыннарга бергә тәэсир итү кушылманың гомуми үлемечле йогынтысын көчәйтергә мөмкин. Өлкәннәр өчен матдә биоанализларында малатионның карвон яки эвкалиптол яки эвкалиптол яки диалил дисульфид яки α-пинен белән синергетик булуы ачыкланды, бу аның лимонен һәм ди кушылганда синергетик булуын күрсәтә. Аллил трисульфидтан кала, терпен кушылмаларының тулы портфолиосы өчен яхшы синергетик аллерцид кандидатлары. Thangam һәм Kathiresan61 шулай ук малатионның үлән экстрактлары белән синергетик йогынтысының охшаш нәтиҗәләре турында хәбәр иттеләр. Бу синергетик җавап малатион һәм фитохимик матдәләрнең бөҗәкләрне детоксикацияләүче ферментларга берләшкән токсик йогынтысы белән бәйле булырга мөмкин. Малатион кебек органофосфатлар, гадәттә, цитохром P450 эстеразаларын һәм монооксигеназаларны 62,63,64 ингибирлау юлы белән эш итә. Шуңа күрә, малатионны бу тәэсир итү механизмнары белән һәм терпеннарны төрле тәэсир итү механизмнары белән берләштерү чебеннәргә гомуми үлемгә китерүче йогынтыны көчәйтергә мөмкин.
Икенче яктан, антагонизм сайланган кушылмаларның берләшмәдә аерым һәр кушылмага караганда азрак актив булуын күрсәтә. Кайбер кушылмаларда антагонизмның сәбәбе шунда булырга мөмкин: бер кушылма икенче кушылманың үз-үзен тотышын сеңдерү, таралу, метаболизм яки чыгару тизлеген үзгәртеп үзгәртә. Баштагы тикшеренүчеләр моны дарулар кушылмаларында антагонизм сәбәбе дип саныйлар. Молекулалар Мөмкин булган механизм 65. Шулай ук, антагонизмның мөмкин булган сәбәпләре охшаш тәэсир итү механизмнары, бер үк рецептор яки максатлы урын өчен состав берләшмәләренең көндәшлеге белән бәйле булырга мөмкин. Кайбер очракларда максатлы аксымның көндәшлексез ингибирлавы да булырга мөмкин. Бу тикшеренүдә ике органосульфур кушылмасы, диалил дисульфид һәм диалил трисульфид, антагонистик эффектлар күрсәттеләр, мөгаен, бер үк максатлы урын өчен көндәшлек аркасында. Шулай ук, бу ике күкерт кушылмасы антагонистик эффектлар күрсәттеләр һәм эудесмол һәм α-пинен белән берләшкәч бернинди дә йогынты ясамадылар. Эудесмол һәм альфа-пинен циклик табигатьтә, ә диалил дисульфид һәм диалил трисульфид алифатик табигатьтә. Химик структурага нигезләнеп, бу кушылмаларның кушылуы гомуми үлемгә китерүче активлыкны арттырырга тиеш, чөнки аларның максатлы урыннары гадәттә төрле34,47, ләкин эксперименталь рәвештә без антагонизм таптык, бу кайбер билгесез организмнарның in vivo системаларындагы үзара бәйләнеш нәтиҗәсендәге роле белән бәйле булырга мөмкин. Шулай ук, цинол һәм α-пинен кушылуы антагонистик җаваплар тудырды, гәрчә тикшеренүчеләр элек ике кушылманың да төрле тәэсир итү максатлары бар дип хәбәр иткәннәр иде47,60. Ике кушылма да циклик монотерпеннар булганлыктан, бәйләү өчен көрәшә һәм өйрәнелгән комбинатор парларның гомуми токсиклыгына йогынты ясый ала торган кайбер уртак максатлы урыннар булырга мөмкин.
LC50 кыйммәтләренә һәм күзәтелгән үлемгә нигезләнеп, ике иң яхшы синергетик терпен комбинациясе сайланды, атап әйткәндә, карвон + лимонен һәм эвкалиптол + эудесмол парлары, шулай ук терпеннар белән синтетик органофосфор малятионы. Малатион + Эудесмол кушылмаларының оптималь синергетик комбинациясе өлкән инсектицид биоанализында сыналды. Бу нәтиҗәле комбинацияләрнең чагыштырмача зур экспозиция киңлекләрендә күп санлы шәхесләргә каршы эшли алуын раслау өчен зур бөҗәк колонияләренә юнәлтелгән. Бу комбинацияләрнең барысы да бөҗәкләрнең зур өерләренә каршы синергетик эффект күрсәтә. Aedes aegypti личинкаларының зур популяцияләренә каршы сыналган оптималь синергетик личинка каршы комбинация өчен охшаш нәтиҗәләр алынды. Шулай итеп, үсемлек EO кушылмаларының нәтиҗәле синергетик личинка каршы һәм өлкәнлеккә каршы комбинациясе гамәлдәге синтетик химик матдәләргә каршы көчле кандидат булып тора һәм Aedes aegypti популяцияләрен контрольдә тоту өчен кулланылырга мөмкин дип әйтергә мөмкин. Шулай ук, синтетик ларвицидларның яки олыларга каршы даруларның терпеннар белән нәтиҗәле комбинацияләре чебеннәргә бирелгән тиметфос яки малатион дозаларын киметү өчен дә кулланылырга мөмкин. Бу көчле синергетик комбинацияләр Aedes чебеннәрендә даруларга каршы торучанлык эволюциясе буенча киләчәктәге тикшеренүләр өчен чишелешләр тәкъдим итә ала.
Aedes aegypti йомыркалары Дибругархтагы Региональ Медицина Тикшеренүләре Үзәгеннән, Һиндстан Медицина Тикшеренүләре Советыннан җыелды һәм Гаухати Университетының Зоология кафедрасында контрольдә тотылган температурада (28 ± 1 °C) һәм дымлылыкта (85 ± 5%) түбәндәге шартларда тотылды: Ариволи һ.б. тасвирланды. Йомыркадан чыкканнан соң, личинкаларга личинка азыгы (эт печеньесы порошогы һәм чүпрә 3:1 нисбәтендә), ә өлкән чебеннәргә 10% глюкоза эремәсе бирелде. Чыганак чыкканнан соң 3 нче көннән башлап, өлкән ана чебеннәргә альбинос тычканнарның канын суырырга рөхсәт ителде. Фильтр кәгазен стакандагы суда чылатыгыз һәм йомырка салу өчен читлеккә куегыз.
Сайланган үсемлек үрнәкләре, атап әйткәндә, эвкалипт яфраклары (Myrtaceae), изге базилик (Lamiaceae), бөтнек (Lamiaceae), мелалеука (Myrtaceae) һәм аллиум суганчалары (Amaryllidaceae). Гувахатидан җыелган һәм Гаухати университетының ботаника бүлеге тарафыннан ачыкланган. Җыелган үсемлек үрнәкләре (500 г) 6 сәгать дәвамында Clevenger аппараты ярдәмендә гидродистилляциягә дучар ителгән. Алынган EO чиста пыяла флаконнарда җыелган һәм алга таба өйрәнү өчен 4°C температурада сакланган.
Личинкаларга каршы токсиклык бераз үзгәртелгән стандарт Бөтендөнья сәламәтлек саклау оешмасы процедуралары ярдәмендә өйрәнелде 67. Эмульгатор буларак DMSO кулланыгыз. Һәр EO концентрациясе башта 100 һәм 1000 ppm концентрациясендә тикшерелде, һәр кабатлауда 20 личинка ачыкланды. Нәтиҗәләргә нигезләнеп, концентрация диапазоны кулланылды һәм үлем 1 сәгатьтән 6 сәгатькә кадәр (1 сәгатьлек интерваллар белән), һәм эшкәртүдән соң 24, 48 һәм 72 сәгатьтә теркәлде. Сублеталь концентрацияләр (LC50) 24, 48 һәм 72 сәгать тәэсир иткәннән соң билгеләнде. Һәр концентрация өч тапкыр бер тискәре контроль (су гына) һәм бер уңай контроль (DMSO белән эшкәртелгән су) белән бергә тикшерелде. Әгәр купировка барлыкка килсә һәм контроль төркем личинкаларының 10% тан артыгы үлсә, эксперимент кабатлана. Әгәр контроль төркемдә үлем күрсәткече 5-10% арасында булса, Abbott төзәтү формуласын кулланыгыз 68.
Ramar һ.б. 69 тарафыннан тасвирланган ысул, ацетонны эреткеч буларак кулланып, Aedes aegypti чиркейләренә каршы өлкәннәр өчен биоанализ өчен кулланылды. Һәрбер EO башта 100 һәм 1000 ppm концентрацияләрендә өлкән Aedes aegypti чиркейләренә каршы тикшерелде. Һәр әзерләнгән эремәдән 2 мл Ватман санына сөртегез. 1 фильтр кәгазе кисәге (12 x 15 см2 зурлыкта) һәм ацетонны 10 минутка парга әйләндерегез. Контроль буларак, бары тик 2 мл ацетон белән эшкәртелгән фильтр кәгазе кулланылды. Ацетон парга әйләнгәннән соң, эшкәртелгән фильтр кәгазе һәм контроль фильтр кәгазе цилиндрик трубкага (10 см тирәнлектә) урнаштырыла. Кан белән тукланмаган ун 3-4 көнлек чиркей һәр концентрациядәге өчләтәгә күчерелде. Алдан үткәрелгән сынаулар нәтиҗәләренә нигезләнеп, сайланган майларның төрле концентрацияләре тикшерелде. Үлем очраклары чиркейләр чыгарылганнан соң 1 сәгать, 2 сәгать, 3 сәгать, 4 сәгать, 5 сәгать, 6 сәгать, 24 сәгать, 48 сәгать һәм 72 сәгатьтән соң теркәлгән. LC50 кыйммәтләрен 24 сәгать, 48 сәгать һәм 72 сәгатьлек экспозиция вакыты өчен исәпләгез. Әгәр контроль партиянең үлем күрсәткече 20% тан артса, бөтен тестны кабатлагыз. Шулай ук, әгәр контроль төркемдә үлем күрсәткече 5% тан артса, эшкәртелгән үрнәкләр өчен нәтиҗәләрне Эбботт формуласын кулланып көйләгез68.
Сайланган эфир майларының состав өлешләрен анализлау өчен газ хроматографиясе (Agilent 7890A) һәм масса-спектрометрия (Accu TOF GCv, Jeol) үткәрелде. GC FID детекторы һәм капилляр колонка (HP5-MS) белән җиһазландырылган. Ташучы газ гелий иде, агым тизлеге 1 мл/мин иде. GC программасы Allium sativumны 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M, ә Ocimum Sainttumны 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 – 280, ялкау өчен 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, эвкалипт өчен 20.60-1M-10-200-3M-30-280, ә кызыл өчен 10 итеп билгели. Мең катлам өчен алар 10: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M.
Һәрбер EO-ның төп кушылмалары GC хроматограммасыннан һәм масса-спектрометрия нәтиҗәләреннән исәпләнгән мәйдан проценты нигезендә билгеләнде (NIST 70 стандартлары базасына сылтама белән).
Һәрбер EO составындагы ике төп кушылма GC-MS нәтиҗәләренә нигезләнеп сайланды һәм алга таба биоанализлар өчен Sigma-Aldrich компаниясеннән 98–99% сафлыкта сатып алынды. Кушылмалар югарыда тасвирланганча, Aedes aegypti'га каршы ларвицид һәм өлкәннәр өчен нәтиҗәлелеккә тикшерелде. Иң еш кулланыла торган синтетик ларвицидлар тамефосат (Sigma Aldrich) һәм өлкәннәр өчен дару малатионы (Sigma Aldrich), шул ук процедураны үтәп, сайланган EO кушылмалары белән нәтиҗәлелеген чагыштыру өчен анализланды.
Сайланган терпен кушылмаларының һәм терпен кушылмаларының, шулай ук коммерция органофосфатларының (тилефос һәм малатион) икеләтә катнашмалары һәр кандидат кушылманың LC50 дозасын 1:1 нисбәтендә кушып әзерләнде. Әзерләнгән кушылмалар югарыда тасвирланганча Aedes aegypti личинка һәм өлкән стадияләрендә сыналды. Һәр биоанализ һәр кушылма өчен өч тапкыр һәм һәр кушылмада булган аерым кушылмалар өчен өч тапкыр үткәрелде. Максатчан бөҗәкләрнең үлеме 24 сәгатьтән соң теркәлде. Түбәндәге формуланы кулланып, икеләтә катнашма өчен көтелгән үлем күрсәткечен исәпләгез.
монда E = Aedes aegypti чебеннәренең бинар комбинациягә, ягъни бәйләнешкә (A + B) җавап итеп көтелгән үлем күрсәткече.
Һәр бинар катнашманың эффекты Pavla52 тарафыннан тасвирланган ысул белән исәпләнгән χ2 кыйммәтенә нигезләнеп синергетик, антагонистик яки бернинди эффект та булмаган дип билгеләнде. Һәр комбинация өчен χ2 кыйммәтен түбәндәге формула ярдәмендә исәпләгез.
Хисапланган χ2 кыйммәте тиешле иреклелек дәрәҗәләре өчен таблица кыйммәтеннән зуррак булганда (95% ышаныч интервалы) һәм күзәтелгән үлем күрсәткече көтелгән үлем күрсәткеченнән артып киткәндә, комбинациянең эффекты синергетик дип билгеләнде. Шулай ук, әгәр теләсә нинди комбинация өчен исәпләнгән χ2 кыйммәте кайбер иреклелек дәрәҗәләре белән таблица кыйммәтеннән артып китсә, ләкин күзәтелгән үлем күрсәткече көтелгән үлем күрсәткеченнән түбәнрәк булса, дәвалау антагонистик дип санала. Әгәр теләсә нинди комбинациядә χ2 исәпләнгән кыйммәте тиешле иреклелек дәрәҗәләрендә таблица кыйммәтеннән кимрәк булса, комбинациянең бернинди эффекты да юк дип санала.
Күп санлы бөҗәкләргә каршы сынау өчен өчтән дүрткә кадәр потенциаль синергетик комбинация (100 личинка һәм 50 личинкага каршы һәм өлкән бөҗәкләргә каршы активлык) сайланды. Өлкән бөҗәкләргә каршы сынау югарыда күрсәтелгәнчә дәвам итә. Катнашмалар белән беррәттән, сайланган катнашмалардагы аерым кушылмалар да Aedes aegypti личинкалары һәм өлкән бөҗәкләренең тигез санында сыналды. Катнашма нисбәте бер кандидат кушылманың бер өлеше LC50 дозасы һәм икенче состав өлешенең LC50 дозасы. Өлкәннәр активлыгы биоанализында сайланган кушылмалар эреткеч ацетонда эретелде һәм 1300 см3 цилиндрик пластик савытка төрелгән фильтр кәгазенә сөртелде. Ацетон 10 минут парга әйләндерелде һәм өлкән бөҗәкләрне чыгардылар. Шулай ук, личинкага каршы биоанализда LC50 кандидат кушылмаларының дозалары башта тигез күләмдәге DMSOда эретелде, аннары 1300 см3 пластик савытларда сакланган 1 литр су белән кушылды, һәм личинкалар чыгарылды.
LC50 кыйммәтләрен исәпләү өчен SPSS (16 версия) һәм Minitab программа тәэминаты ярдәмендә теркәлгән 71 үлем мәгълүматының ихтималлык анализы үткәрелде.
Бастырылган вакыты: 2024 елның 1 июле